作者onlyone0419 (期待)
看板Biotech
标题[求救] 分离小鼠脾脏Macrophage
时间Sun Nov 9 14:29:32 2008
请问有大大做过分离spleen macrophage的实验吗?
我是将spleen磨碎後
先用RBC lysis buffer将红血球打破
wash 3次後用贴复的方式培养(RPMI-1640)
可是他就是不给我贴= =，不像腹腔Macrophage那麽会贴...
我1、2、4小时都有镜检，都几乎没贴
後来放整晚也不贴...
实在是伤脑筋@..@
希望有经验的大师们能倾囊相授<(_ _)>
--
http://www.wretch.cc/blog/yorkshire419
漫画、涂鸦、研究所K书日志
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 134.208.25.219
※ 编辑: onlyone0419 来自: 134.208.25.219 (11/09 14:33)
1F：推 Nikio:考不考虑先在盘子上coating abs for macrophage receptors? 11/09 23:40
2F：→ Nikio:然後轻轻的把没抓到的细胞洗掉，几次後就蛮纯了 11/09 23:41
3F：→ Nikio:古早的纯化CD4细胞的方法，蛮管用的！不知道您适不适用？ 11/09 23:42
4F：推 oypicard:用flow or MACS sorting? 11/10 17:52
5F：推 SQRT:有需要去掉RBC吗?RBC本来就不会贴了,何必去掉它?! 11/10 20:10
6F：→ onlyone0419:有PAPER说会影响他贴的效果@@ 11/10 23:45
7F：推 lovesteve:其实可以考虑用percoll or histopaque分的效果不错 11/11 12:57
8F：→ onlyone0419:脾脏也能用Percool喔~? 11/11 22:00