作者vetcarrie (期待過一天)
看板Biotech
標題[求救] membrane protein extraction
時間Wed Nov 5 00:07:28 2008
我最近在做一個memb protein
一開始是收完細胞後 加入lysis buffer只放置五分鐘 就去離心
但是western都壓不到任何東西
後來改了protocol
改成連lysis buffer都不加 直接加loading dye之後就拿去煮
然後跑電泳 可是還是壓不到東西
我的protein liading量也提高了
請問要extract memb protein有什麼特殊的方法或是protocol嗎
我們實驗室目前是不考慮買kit喔
所以希望是傳統的方法 謝謝
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◆ From: 61.217.247.139
1F：推 alaric:PAGE 可以看到你要的Protein? Western ok ? 11/05 01:31
2F：推 sharkcell:試試看添加Triton-X 100 11/05 01:32
3F：→ alaric:找跟你用同樣材料, 抽membrane protein分析的. 11/05 01:33
4F：推 Duckhunter:positive control 有壓到嗎? 11/06 21:35
5F：推 Nikio:loading dye應該可以弄出膜蛋白吧?是不是你抗體有問題? 11/09 23:46
6F：→ Nikio:找個膜蛋白的positive control壓壓看 膜蛋白一般量都不多 11/09 23:47
7F：→ vetcarrie:我們目前沒有positive control 11/14 16:27
8F：→ vetcarrie:所以無法確認是不是抗體問題 11/14 16:27