作者vetcarrie (期待过一天)
看板Biotech
标题[求救] membrane protein extraction
时间Wed Nov 5 00:07:28 2008
我最近在做一个memb protein
一开始是收完细胞後 加入lysis buffer只放置五分钟 就去离心
但是western都压不到任何东西
後来改了protocol
改成连lysis buffer都不加 直接加loading dye之後就拿去煮
然後跑电泳 可是还是压不到东西
我的protein liading量也提高了
请问要extract memb protein有什麽特殊的方法或是protocol吗
我们实验室目前是不考虑买kit喔
所以希望是传统的方法 谢谢
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◆ From: 61.217.247.139
1F：推 alaric:PAGE 可以看到你要的Protein? Western ok ? 11/05 01:31
2F：推 sharkcell:试试看添加Triton-X 100 11/05 01:32
3F：→ alaric:找跟你用同样材料, 抽membrane protein分析的. 11/05 01:33
4F：推 Duckhunter:positive control 有压到吗? 11/06 21:35
5F：推 Nikio:loading dye应该可以弄出膜蛋白吧?是不是你抗体有问题? 11/09 23:46
6F：→ Nikio:找个膜蛋白的positive control压压看 膜蛋白一般量都不多 11/09 23:47
7F：→ vetcarrie:我们目前没有positive control 11/14 16:27
8F：→ vetcarrie:所以无法确认是不是抗体问题 11/14 16:27