作者yuching23 (青)
看板Biotech
標題[求救]看不懂Western blot
時間Tue Nov 4 20:39:30 2008
在看paper時,有一張電泳圖不是很懂,
圖片連結:
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=yuching23&book=5
密碼:ptt
想請問為什麼在照射UVB 60及480min時,
p-JNK及p-ERK的band會沒有,但t-JNK及t-ERK的band會出現,
不是一樣都在UVB照射下,用antibody去抓,
怎麼t-JNK和t-ERK不會受影響呀?
出處:Fucoidan Inhibits UVB-Induced MMP-1 Expression in Human Skin
Fibroblasts(Biol. Pharm. Bull. 31(2) 284—289 (2008))
此外,會有人知道fucoidan對細胞的機轉作用嗎?是如何使細胞體內的MMP-1受到抑制,
是在細胞膜表面就有fucoidan的receptor嗎?因為fucoidan是水溶性的,所以到底是如
何去保護細胞體的呢???
謝謝~
--
http://www.wretch.cc/album/yuching23
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.162.194.164
1F：推 tsubasawolfy:體內原本就有JNK ERK 只是有沒有活化..60跟480我覺得 11/04 20:50
2F：→ tsubasawolfy:是signal transduction過去了 11/04 20:51
3F：推 tsubasawolfy:恩阿 原文也有寫在30min時兩者活化效能最大 11/04 20:55
4F：推 leoblack:t是指細胞中total JNK/ERK啊~實驗就是看有沒有被磷酸化 11/04 21:18
5F：→ leoblack:另外~不知是否是我個人才疏學淺~講"電泳"會誤會成DNA/RNA 11/04 21:19
6F：→ leoblack:應該要說"WB(western blot)"~ 11/04 21:20
7F：→ yuching23:那為什麼在t-JNK和t-ERK在60及480的band都在 如果說在 11/05 05:39
8F：→ yuching23:受UVB刺激,p-JNK及p-ERK在照射60及480分鐘後訊號變弱, 11/05 05:43
9F：→ yuching23:那為什麼total的部份沒有相對變弱呢?(一樣受UVB照射) 11/05 05:44
※ 編輯: yuching23 來自: 218.162.192.7 (11/05 05:45)
10F：→ yuching23:可是它p開頭指的就是磷酸化的部份,而total是指loading 11/05 05:51
11F：→ yuching23:control...... 11/05 05:53
12F：→ yuching23:會不會是...假設loading的細胞是等量,內含JNK及ERK一定 11/05 06:47
13F：→ yuching23:是相同的嘛!!但受UVB刺激60~480min,JNK及ERK的signal 11/05 06:48
14F：→ yuching23:trasduction變弱,所以磷酸化(活化)JNK及ERK不明顯 11/05 06:49
15F：→ yuching23:但total不會改變,可能是未磷酸化的JNK及ERK相對比30MIN 11/05 06:50
16F：→ yuching23:多~~~你們想表達的是這個意思嗎??還是我解讀錯誤呀~唉 11/05 06:50
17F：推 tsubasawolfy:Loading Control的意思是指他想表達他load的JNK跟 11/05 08:48
18F：→ tsubasawolfy:ERK每個well都是等量的 並沒有哪個load多phosphoryla 11/05 08:48
19F：→ tsubasawolfy:tion就變多 簡單講就是總量不變 變的只是P化的程度 11/05 08:49
20F：→ tsubasawolfy:不過他應該再多一組internal control比較好- -a 11/05 08:50