作者yuching23 (青)
看板Biotech
标题[求救]看不懂Western blot
时间Tue Nov 4 20:39:30 2008
在看paper时,有一张电泳图不是很懂,
图片连结:
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=yuching23&book=5
密码:ptt
想请问为什麽在照射UVB 60及480min时,
p-JNK及p-ERK的band会没有,但t-JNK及t-ERK的band会出现,
不是一样都在UVB照射下,用antibody去抓,
怎麽t-JNK和t-ERK不会受影响呀?
出处:Fucoidan Inhibits UVB-Induced MMP-1 Expression in Human Skin
Fibroblasts(Biol. Pharm. Bull. 31(2) 284—289 (2008))
此外,会有人知道fucoidan对细胞的机转作用吗?是如何使细胞体内的MMP-1受到抑制,
是在细胞膜表面就有fucoidan的receptor吗?因为fucoidan是水溶性的,所以到底是如
何去保护细胞体的呢???
谢谢~
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http://www.wretch.cc/album/yuching23
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.162.194.164
1F：推 tsubasawolfy:体内原本就有JNK ERK 只是有没有活化..60跟480我觉得 11/04 20:50
2F：→ tsubasawolfy:是signal transduction过去了 11/04 20:51
3F：推 tsubasawolfy:恩阿 原文也有写在30min时两者活化效能最大 11/04 20:55
4F：推 leoblack:t是指细胞中total JNK/ERK啊~实验就是看有没有被磷酸化 11/04 21:18
5F：→ leoblack:另外~不知是否是我个人才疏学浅~讲"电泳"会误会成DNA/RNA 11/04 21:19
6F：→ leoblack:应该要说"WB(western blot)"~ 11/04 21:20
7F：→ yuching23:那为什麽在t-JNK和t-ERK在60及480的band都在 如果说在 11/05 05:39
8F：→ yuching23:受UVB刺激,p-JNK及p-ERK在照射60及480分钟後讯号变弱, 11/05 05:43
9F：→ yuching23:那为什麽total的部份没有相对变弱呢?(一样受UVB照射) 11/05 05:44
※ 编辑: yuching23 来自: 218.162.192.7 (11/05 05:45)
10F：→ yuching23:可是它p开头指的就是磷酸化的部份,而total是指loading 11/05 05:51
11F：→ yuching23:control...... 11/05 05:53
12F：→ yuching23:会不会是...假设loading的细胞是等量,内含JNK及ERK一定 11/05 06:47
13F：→ yuching23:是相同的嘛!!但受UVB刺激60~480min,JNK及ERK的signal 11/05 06:48
14F：→ yuching23:trasduction变弱,所以磷酸化(活化)JNK及ERK不明显 11/05 06:49
15F：→ yuching23:但total不会改变,可能是未磷酸化的JNK及ERK相对比30MIN 11/05 06:50
16F：→ yuching23:多~~~你们想表达的是这个意思吗??还是我解读错误呀~唉 11/05 06:50
17F：推 tsubasawolfy:Loading Control的意思是指他想表达他load的JNK跟 11/05 08:48
18F：→ tsubasawolfy:ERK每个well都是等量的 并没有哪个load多phosphoryla 11/05 08:48
19F：→ tsubasawolfy:tion就变多 简单讲就是总量不变 变的只是P化的程度 11/05 08:49
20F：→ tsubasawolfy:不过他应该再多一组internal control比较好- -a 11/05 08:50