作者rainforest10 (rainforest10)
看板Biotech
標題[求救] antisense oligonucleotide (ASO)作用機制
時間Sun Nov 2 07:10:21 2008
在The American Journal of Human Genetics中
的一篇
Antisense Masking of an hnRNP A1/A2
Intronic Splicing Silencer
Corrects SMN2 Splicing in Transgenic Mice
作者利用了antisense oligonucletide (ASO)-tiling method找到了兩個ISS區域
一個在intron6另一個在intron7
作者來用2'-O-methoxyethyl-modified(MOE)來修飾ASO
作者利用這個方法是利用怎樣的原理呢?
我目前只知道ASO是單股RNA,送入細胞後,進入核內
單股RNA會與相符合的RNA結合,產生RNAi的作用
可是如果此實驗是利用RNAi
那作者就沒辦法用RT-PCR去得知exon7是否被splicing
因為該股RNA已經被deletion掉了,不是嗎?
因為自己的基本觀念不夠
查了很多但也看不懂
如果以上有觀念錯誤,請見諒>"<
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.175.180.229
1F：推 chvkimo:內文倒數第2行,應該是intron 7吧?? 11/02 09:42
2F：→ rainforest10:內文@@?PAPER嗎?還是我打的文章?是EXON7沒錯^^" 11/02 11:19
因為作者們在研究治癒SMA (spinal muscular atrophy)
發病的主要原因是病患中的SMN2在splicing時,將exon7 splicing
導致無法產生有作用的protein
※ 編輯: rainforest10 來自: 218.175.180.229 (11/02 11:22)
3F：推 chvkimo:喔~~那我就看不懂這篇了 @@ 11/02 12:12
※ 編輯: rainforest10 來自: 218.175.180.229 (11/02 12:55)
4F：推 nzj:ASO不是當作探針? 11/02 18:13
5F：推 nzj:是in vivo或invitro的實驗 11/02 18:16
6F：→ rainforest10:探針@@?作者最後有說ASO可以治療SMA,克服BBB的話 11/02 19:41
7F：推 sGoat:它是利用短片段RNA去遮蓋ISS的辨識位置,使exon 7被inclusion 11/04 11:34
8F：→ sGoat:的機率增加,所以才可以做splicing以及overexpression後續 11/04 11:37
9F：→ sGoat:所以有做ASO或是點突變破壞A1/A2 motif去確認效果 11/04 11:39
10F：→ sGoat:但是由於點突變是天生的,所以認為ASO可以充當替代療法 11/04 11:40
11F：→ sGoat:抱歉走眼,不一定要RNA,送入ASO只要有antisense即可 11/04 11:42