作者rainforest10 (rainforest10)
看板Biotech
标题[求救] antisense oligonucleotide (ASO)作用机制
时间Sun Nov 2 07:10:21 2008
在The American Journal of Human Genetics中
的一篇
Antisense Masking of an hnRNP A1/A2
Intronic Splicing Silencer
Corrects SMN2 Splicing in Transgenic Mice
作者利用了antisense oligonucletide (ASO)-tiling method找到了两个ISS区域
一个在intron6另一个在intron7
作者来用2'-O-methoxyethyl-modified(MOE)来修饰ASO
作者利用这个方法是利用怎样的原理呢?
我目前只知道ASO是单股RNA,送入细胞後,进入核内
单股RNA会与相符合的RNA结合,产生RNAi的作用
可是如果此实验是利用RNAi
那作者就没办法用RT-PCR去得知exon7是否被splicing
因为该股RNA已经被deletion掉了,不是吗?
因为自己的基本观念不够
查了很多但也看不懂
如果以上有观念错误,请见谅>"<
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.175.180.229
1F：推 chvkimo:内文倒数第2行,应该是intron 7吧?? 11/02 09:42
2F：→ rainforest10:内文@@?PAPER吗?还是我打的文章?是EXON7没错^^" 11/02 11:19
因为作者们在研究治癒SMA (spinal muscular atrophy)
发病的主要原因是病患中的SMN2在splicing时,将exon7 splicing
导致无法产生有作用的protein
※ 编辑: rainforest10 来自: 218.175.180.229 (11/02 11:22)
3F：推 chvkimo:喔~~那我就看不懂这篇了 @@ 11/02 12:12
※ 编辑: rainforest10 来自: 218.175.180.229 (11/02 12:55)
4F：推 nzj:ASO不是当作探针? 11/02 18:13
5F：推 nzj:是in vivo或invitro的实验 11/02 18:16
6F：→ rainforest10:探针@@?作者最後有说ASO可以治疗SMA,克服BBB的话 11/02 19:41
7F：推 sGoat:它是利用短片段RNA去遮盖ISS的辨识位置,使exon 7被inclusion 11/04 11:34
8F：→ sGoat:的机率增加,所以才可以做splicing以及overexpression後续 11/04 11:37
9F：→ sGoat:所以有做ASO或是点突变破坏A1/A2 motif去确认效果 11/04 11:39
10F：→ sGoat:但是由於点突变是天生的,所以认为ASO可以充当替代疗法 11/04 11:40
11F：→ sGoat:抱歉走眼,不一定要RNA,送入ASO只要有antisense即可 11/04 11:42