作者ILoveSheep (ˇpaakoiˇ)
看板Biotech
標題[討論] 跑ＳＤＳ時蛋白濃度過高會有甚麼缺點嗎？
時間Thu Oct 30 17:54:57 2008
突然想到這個問題
就是不知道大家在跑ＳＤＳ定蛋白值的量大概定多少會覺得高阿
或許這樣問怪怪的
我是想知道如果濃度太高會不會有不好的結果發生
還有一個問題
破完細胞（用RIPA）要收細胞時
我們家會用10000ＲＣＦ離心取上清液（蛋白）
但我有幾次晃神就很順的用14000ＲＰＭ給他轉下去
結果其實沒有差很多啦（因為都沒結果我還在try ＸＤ）
請問有沒有人知道會有怎樣的差別呢？？
實驗真不順 改天要來拜拜了囧
先感謝各位的討論啦
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◆ From: 140.128.195.241
1F：→ sGoat:分離pellet與soluble fraction的效果好一點點 10/30 17:58
2F：→ sGoat:即使是超高速離心也只能分胞器,對於蛋白是沒啥影響的 10/30 17:59
3F：→ sGoat:當然膜蛋白例外,沒差別的是soluble form的... 10/30 18:00
4F：推 tsubasawolfy:蛋白量的多寡要看你想看的蛋白質 10/30 18:04
5F：→ tsubasawolfy:膜蛋白就可能要load很多 分子量超大的也需要多 10/30 18:05
6F：→ ILoveSheep:喔喔喔～ 謝謝你們 不過為甚麼大分子蛋白也要多阿？ 10/30 20:22
7F：推 tsubasawolfy:transfer效率 10/30 21:33
8F：→ ILoveSheep:喔喔~暸改謝謝~~ 10/30 23:17
9F：推 blence:transfer效率,表現量偏低,或個別抗體不佳?三者是難以區別的 10/30 23:28
10F：推 tsubasawolfy:把transfer完的gel拿去染就知道效率了Orz 10/30 23:37
11F：→ ILoveSheep:不知道抗體不佳有沒有辦法特別知道阿...不然都要猜... 10/31 23:30