作者ILoveSheep (ˇpaakoiˇ)
看板Biotech
标题[讨论] 跑ＳＤＳ时蛋白浓度过高会有甚麽缺点吗？
时间Thu Oct 30 17:54:57 2008
突然想到这个问题
就是不知道大家在跑ＳＤＳ定蛋白值的量大概定多少会觉得高阿
或许这样问怪怪的
我是想知道如果浓度太高会不会有不好的结果发生
还有一个问题
破完细胞（用RIPA）要收细胞时
我们家会用10000ＲＣＦ离心取上清液（蛋白）
但我有几次晃神就很顺的用14000ＲＰＭ给他转下去
结果其实没有差很多啦（因为都没结果我还在try ＸＤ）
请问有没有人知道会有怎样的差别呢？？
实验真不顺 改天要来拜拜了囧
先感谢各位的讨论啦
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◆ From: 140.128.195.241
1F：→ sGoat:分离pellet与soluble fraction的效果好一点点 10/30 17:58
2F：→ sGoat:即使是超高速离心也只能分胞器,对於蛋白是没啥影响的 10/30 17:59
3F：→ sGoat:当然膜蛋白例外,没差别的是soluble form的... 10/30 18:00
4F：推 tsubasawolfy:蛋白量的多寡要看你想看的蛋白质 10/30 18:04
5F：→ tsubasawolfy:膜蛋白就可能要load很多 分子量超大的也需要多 10/30 18:05
6F：→ ILoveSheep:喔喔喔～ 谢谢你们 不过为甚麽大分子蛋白也要多阿？ 10/30 20:22
7F：推 tsubasawolfy:transfer效率 10/30 21:33
8F：→ ILoveSheep:喔喔~了改谢谢~~ 10/30 23:17
9F：推 blence:transfer效率,表现量偏低,或个别抗体不佳?三者是难以区别的 10/30 23:28
10F：推 tsubasawolfy:把transfer完的gel拿去染就知道效率了Orz 10/30 23:37
11F：→ ILoveSheep:不知道抗体不佳有没有办法特别知道阿...不然都要猜... 10/31 23:30