作者kfhgf (dodo)
看板Biotech
標題[求救] 免疫組織切片染色(Human Nuclei)
時間Thu Oct 30 12:08:29 2008
大家好
我是免疫組織染色的新手
最近在做Human Nuclei的染色
我們主要是將細胞移植到動物體內之後
做冷凍切片
染Human Nuclei以確定細胞是我們打進去的細胞
在In Vitro的染色上都可以染的到
但是In Vivo每次都染不到Human Nuclei
我的實驗步驟如下
1. 切片air-dry
2. 以PBST wash
3. 用5%脫脂奶blocking
4. PBST wash
5. 加入anti-HN antibody作用overnight
6. PBST wash
7. anti-mouse/FITC antibody
8. PBST wash
9. DAPI
10.PBST wash
這是我們實驗室的步驟
不知道是不是少了哪些步驟
導致一直無法染到Human Nuclei
如果大家有相關的經驗
麻煩可以給我一些意見
拜託哩！！！
謝謝！！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.153.200
1F：推 apa9394:有用acetic acid加熱過嗎? 10/30 13:26
2F：推 oopa:acetic acid加熱通常是用於石蠟包埋的切片樣本(Ag retrieval) 10/31 19:21
3F：→ kfhgf:沒有加熱耶... 11/03 12:49
4F：推 agh0913: 冷凍切片 還是 石蠟切片 如過是 冷凍切片 你少了 固定 11/15 18:56
5F：推 agh0913:如果 你是使用 Chemicon 那隻抗體 不可用 methanol固定 11/15 19:30
6F：→ agh0913:要使用 paraformaldehyde固定組織 11/15 19:31