作者kfhgf (dodo)
看板Biotech
标题[求救] 免疫组织切片染色(Human Nuclei)
时间Thu Oct 30 12:08:29 2008
大家好
我是免疫组织染色的新手
最近在做Human Nuclei的染色
我们主要是将细胞移植到动物体内之後
做冷冻切片
染Human Nuclei以确定细胞是我们打进去的细胞
在In Vitro的染色上都可以染的到
但是In Vivo每次都染不到Human Nuclei
我的实验步骤如下
1. 切片air-dry
2. 以PBST wash
3. 用5%脱脂奶blocking
4. PBST wash
5. 加入anti-HN antibody作用overnight
6. PBST wash
7. anti-mouse/FITC antibody
8. PBST wash
9. DAPI
10.PBST wash
这是我们实验室的步骤
不知道是不是少了哪些步骤
导致一直无法染到Human Nuclei
如果大家有相关的经验
麻烦可以给我一些意见
拜托哩！！！
谢谢！！
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◆ From: 140.128.153.200
1F：推 apa9394:有用acetic acid加热过吗? 10/30 13:26
2F：推 oopa:acetic acid加热通常是用於石蜡包埋的切片样本(Ag retrieval) 10/31 19:21
3F：→ kfhgf:没有加热耶... 11/03 12:49
4F：推 agh0913: 冷冻切片 还是 石蜡切片 如过是 冷冻切片 你少了 固定 11/15 18:56
5F：推 agh0913:如果 你是使用 Chemicon 那只抗体 不可用 methanol固定 11/15 19:30
6F：→ agh0913:要使用 paraformaldehyde固定组织 11/15 19:31