作者fjubiology (Science閱讀俱樂部)
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標題Re: [求救] 為什麼在鈣離子濃度測試時要使用"F340/ …
時間Sun Oct 19 13:15:10 2008
※ 引述《rd2l4 (Miss Dau)》之銘言：
: 欸，很抱歉是個無能的大學生所以完全不知道...
: google了一下，都是在方法([Ca2+] measurement)中提到說，
: 要測定這兩個波長的螢光比值來確認鈣離子的濃度
: 我想請問，為何是這兩種波長？有什麼特殊意義嗎？
: 他的比值有公式計算我有看到，只是很想了解為何而已...
: 感謝大家
: -----------
: 另外請問，常常看到有實驗在做鈣離子測試時順便做細胞外的Ca2+-free test
: 請問這個動作是要確認什麼？
: 在我的想法裡，細胞內的鈣離子濃度變高應該就是從外面來的啊
: 又不會無中生有...
: 這樣的一個實驗究竟有何意義呢？
: 麻煩大家了
: 如果是個蠢問題....請原諒我是個笨蛋，並且請讓笨蛋不這麼笨吧
: 謝謝
以Fura2/AM來說:
Fura2/AM：Ca2+ -sensitive fluorescent probe
Ex： Ca2+-bound form (340 nm)
Ca2+-free form (380 nm)
可根據兩個比值求出calcium ion的量
撇開extracellular calcium con.
細胞內會儲存calcium ion的胞器有ER (含量最高), mitochondria (次之)
extra: 1 mM, cytosol: 100 nM ,soomth ER: 100-500 microM
Biol Res 35: 177-182, 2002 Calcium signal compartmentalization
OLE H. PETERSEN
兩個胞器平衡細胞內過多或過少的鈣離子，當然他們還有本身的生理功能
例如胞器的運動, 跟mito.膜電位的的變化
會用calcium free的medium主要是觀察細胞內calcium stress下的生理或生化變化
或是MITO,ER間calcium ion con.濃度變化
如想知道更近一步，可以與我討論。 我以前主要是作mito.方面的calcium恆定
對於細胞生理的改變
※ 編輯: fjubiology 來自: 125.224.154.238 (10/19 13:28)
1F：→ rd2l4:十分謝謝你！ 10/19 13:55
2F：推 rd2l4:推一下表達我的感激 10/19 14:05
3F：推 K587262:推強者文！ 10/19 18:33
4F：推 YuChHa:強者我同學!! 10/20 00:01
5F：→ fjubiology:你同學我離開學術界在藥廠工作啦 10/20 00:41
6F：推 rd2l4:我想了這麼久終於在今天想通了(我好笨XD) 再次感謝你XD 10/20 13:35
7F：推 rd2l4:然後我終於肯定我問的是蠢問題了XD 10/20 13:39
8F：推 rd2l4:原來此free非彼free...我誤會了:D 10/20 13:45