作者fjubiology (Science阅读俱乐部)
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标题Re: [求救] 为什麽在钙离子浓度测试时要使用"F340/ …
时间Sun Oct 19 13:15:10 2008
※ 引述《rd2l4 (Miss Dau)》之铭言：
: 欸，很抱歉是个无能的大学生所以完全不知道...
: google了一下，都是在方法([Ca2+] measurement)中提到说，
: 要测定这两个波长的萤光比值来确认钙离子的浓度
: 我想请问，为何是这两种波长？有什麽特殊意义吗？
: 他的比值有公式计算我有看到，只是很想了解为何而已...
: 感谢大家
: -----------
: 另外请问，常常看到有实验在做钙离子测试时顺便做细胞外的Ca2+-free test
: 请问这个动作是要确认什麽？
: 在我的想法里，细胞内的钙离子浓度变高应该就是从外面来的啊
: 又不会无中生有...
: 这样的一个实验究竟有何意义呢？
: 麻烦大家了
: 如果是个蠢问题....请原谅我是个笨蛋，并且请让笨蛋不这麽笨吧
: 谢谢
以Fura2/AM来说:
Fura2/AM：Ca2+ -sensitive fluorescent probe
Ex： Ca2+-bound form (340 nm)
Ca2+-free form (380 nm)
可根据两个比值求出calcium ion的量
撇开extracellular calcium con.
细胞内会储存calcium ion的胞器有ER (含量最高), mitochondria (次之)
extra: 1 mM, cytosol: 100 nM ,soomth ER: 100-500 microM
Biol Res 35: 177-182, 2002 Calcium signal compartmentalization
OLE H. PETERSEN
两个胞器平衡细胞内过多或过少的钙离子，当然他们还有本身的生理功能
例如胞器的运动, 跟mito.膜电位的的变化
会用calcium free的medium主要是观察细胞内calcium stress下的生理或生化变化
或是MITO,ER间calcium ion con.浓度变化
如想知道更近一步，可以与我讨论。 我以前主要是作mito.方面的calcium恒定
对於细胞生理的改变
※ 编辑: fjubiology 来自: 125.224.154.238 (10/19 13:28)
1F：→ rd2l4:十分谢谢你！ 10/19 13:55
2F：推 rd2l4:推一下表达我的感激 10/19 14:05
3F：推 K587262:推强者文！ 10/19 18:33
4F：推 YuChHa:强者我同学!! 10/20 00:01
5F：→ fjubiology:你同学我离开学术界在药厂工作啦 10/20 00:41
6F：推 rd2l4:我想了这麽久终於在今天想通了(我好笨XD) 再次感谢你XD 10/20 13:35
7F：推 rd2l4:然後我终於肯定我问的是蠢问题了XD 10/20 13:39
8F：推 rd2l4:原来此free非彼free...我误会了:D 10/20 13:45