作者nhxcyge (嫩嫩)
看板Biotech
標題[求救] Gel extration
時間Tue Oct 14 21:14:01 2008
最近跑了幾次PCR以及用Restriction Enzyme切plasmid，跑膠時都可看到清淅的band。
不過經過Gel Extration kit extract後去測濃度卻發現ng/uL 都呈現負值，請問這是
什麼問題呢？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.197.50
1F：推 sGoat:Gel Extration失敗,DNA留在膜上,把抽出來的再跑個膠看看 10/14 22:00
2F：推 dankai:酒精沒移除乾淨! 10/14 22:07
3F：推 davideason:慢速過幾次管柱~最後高速甩掉~純水看準點至膜上~放久點 10/14 22:07
4F：→ davideason:在把 DNA離下來 10/14 22:07
5F：推 jsi:我也曾遇過這問題 在排除樓上幾位所述可能的原因之後 我選擇改 10/14 22:13
6F：→ jsi:用不同的Gel Extration kit竟解決了問題 或許您可參考看看 10/14 22:14
7F：推 owl628:請問樓上失敗根成功的kit分別為啥呢?純粹好奇一下,謝謝~ 10/14 23:37
8F：推 jsi:失敗的是一組放了很久才開封使用的Qiagene 後來使用的是Axygen 10/14 23:57
9F：→ jsi:但同一組Axygen也是有人回收率很低 不知是否跟DNA片段特性有關 10/14 23:59
10F：→ jsi:Qiagene->Qiagen btw,原po的kit該加酒精的bfr不知是否確定有加 10/15 00:06
11F：→ jsi:以前學弟mini的kit 忘了加酒精 怎麼抽都抽不到DNA @@~ 10/15 00:08
12F：推 aceliang:忘了加酒精應該沒用幾次就沒了吧= =a 10/15 12:59
13F：推 jademan:purify後的產物有沒有再跑一次膠看看有沒有band? 10/15 16:51