作者nhxcyge (嫩嫩)
看板Biotech
标题[求救] Gel extration
时间Tue Oct 14 21:14:01 2008
最近跑了几次PCR以及用Restriction Enzyme切plasmid，跑胶时都可看到清淅的band。
不过经过Gel Extration kit extract後去测浓度却发现ng/uL 都呈现负值，请问这是
什麽问题呢？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.197.50
1F：推 sGoat:Gel Extration失败,DNA留在膜上,把抽出来的再跑个胶看看 10/14 22:00
2F：推 dankai:酒精没移除乾净! 10/14 22:07
3F：推 davideason:慢速过几次管柱~最後高速甩掉~纯水看准点至膜上~放久点 10/14 22:07
4F：→ davideason:在把 DNA离下来 10/14 22:07
5F：推 jsi:我也曾遇过这问题 在排除楼上几位所述可能的原因之後 我选择改 10/14 22:13
6F：→ jsi:用不同的Gel Extration kit竟解决了问题 或许您可参考看看 10/14 22:14
7F：推 owl628:请问楼上失败根成功的kit分别为啥呢?纯粹好奇一下,谢谢~ 10/14 23:37
8F：推 jsi:失败的是一组放了很久才开封使用的Qiagene 後来使用的是Axygen 10/14 23:57
9F：→ jsi:但同一组Axygen也是有人回收率很低 不知是否跟DNA片段特性有关 10/14 23:59
10F：→ jsi:Qiagene->Qiagen btw,原po的kit该加酒精的bfr不知是否确定有加 10/15 00:06
11F：→ jsi:以前学弟mini的kit 忘了加酒精 怎麽抽都抽不到DNA @@~ 10/15 00:08
12F：推 aceliang:忘了加酒精应该没用几次就没了吧= =a 10/15 12:59
13F：推 jademan:purify後的产物有没有再跑一次胶看看有没有band? 10/15 16:51