作者baby1210 (妹妹兒)
看板Biotech
標題[求救] 還是萃取蛋白質的問題>"<
時間Mon Oct 6 17:24:23 2008
因為後來時間的關係
我來不及參考各位給的建議
( 離心完剩pellet冰在-80度 )
細胞就先用刮勺刮下來,然後使用PBS保存冰在-20度(尚未離心)
保存大概5~6天
這樣對我而後萃取蛋白質
會有很大的影響嗎>"<
有這樣做過的人
可以告訴我嗎?
謝謝大家~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.130.200
1F：推 tsubasawolfy:還是可以做 但下次最好冰-80XD 10/06 17:48
2F：→ tsubasawolfy:上次弄IP丟在4度C讓她轉兩天(後來沒要用就忘了) 10/06 17:49
3F：→ tsubasawolfy:想到後去拿還來自己無聊偷跑看看 還是有很強的signal 10/06 17:50
4F：→ tsubasawolfy:不過要確保你的protease inhibitor要夠量Orz 10/06 17:50
5F：推 blence:有人在還沒lyse cell之前就加protease inhibitor嗎? 10/06 17:58
6F：→ blence:原po的問題就像一塊餅乾掉到地上,吃下去會有很大影響嗎一樣 10/06 18:01
7F：→ blence:可是實驗是自己的,除非弄個對照,否則不會知道影響多大 10/06 18:03
8F：推 malakaki:-20 會產冰晶,這樣細胞就破了,蛋白質溶液分解掉喔!! 10/06 19:12
9F：推 leftt:下次沒時間的話試一下這一招.把貼壁細胞用PBS沖一下, 然後加 10/06 22:08
10F：→ leftt:你的萃取液如T-Per之類的,整個dish周邊用parafilm封好,直接 10/06 22:10
11F：→ leftt:放在-80,放個一兩個月都還可以作Western 10/06 22:11
12F：推 tsubasawolfy:囧 沒注意到還是細胞狀態- - 10/06 22:55
13F：推 chvkimo:推leftt的作法 (趕時間的時候) 10/07 11:36
14F：→ chvkimo:但是我會再用個夾鏈袋裝起來,不然時間久了可能要在雪堆 10/07 11:37
15F：→ chvkimo:裡面找東西 10/07 11:37
16F：推 sGoat:蛋白的東西最好是一次做到完,除非你不太在意你的sample 10/07 15:19
17F：→ sGoat:很多人說實驗做不出來往往是貪圖小小的方便而偷懶 10/07 15:20
18F：→ sGoat:結果造成你後續實驗的困難以及複雜度... 10/07 15:21
19F：→ sGoat:一句老話: 你如何對待你的實驗,它就給你相對的結果 10/07 15:23