作者baby1210 (妹妹儿)
看板Biotech
标题[求救] 还是萃取蛋白质的问题>"<
时间Mon Oct 6 17:24:23 2008
因为後来时间的关系
我来不及参考各位给的建议
( 离心完剩pellet冰在-80度 )
细胞就先用刮勺刮下来,然後使用PBS保存冰在-20度(尚未离心)
保存大概5~6天
这样对我而後萃取蛋白质
会有很大的影响吗>"<
有这样做过的人
可以告诉我吗?
谢谢大家~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.130.200
1F：推 tsubasawolfy:还是可以做 但下次最好冰-80XD 10/06 17:48
2F：→ tsubasawolfy:上次弄IP丢在4度C让她转两天(後来没要用就忘了) 10/06 17:49
3F：→ tsubasawolfy:想到後去拿还来自己无聊偷跑看看 还是有很强的signal 10/06 17:50
4F：→ tsubasawolfy:不过要确保你的protease inhibitor要够量Orz 10/06 17:50
5F：推 blence:有人在还没lyse cell之前就加protease inhibitor吗? 10/06 17:58
6F：→ blence:原po的问题就像一块饼乾掉到地上,吃下去会有很大影响吗一样 10/06 18:01
7F：→ blence:可是实验是自己的,除非弄个对照,否则不会知道影响多大 10/06 18:03
8F：推 malakaki:-20 会产冰晶,这样细胞就破了,蛋白质溶液分解掉喔!! 10/06 19:12
9F：推 leftt:下次没时间的话试一下这一招.把贴壁细胞用PBS冲一下, 然後加 10/06 22:08
10F：→ leftt:你的萃取液如T-Per之类的,整个dish周边用parafilm封好,直接 10/06 22:10
11F：→ leftt:放在-80,放个一两个月都还可以作Western 10/06 22:11
12F：推 tsubasawolfy:囧 没注意到还是细胞状态- - 10/06 22:55
13F：推 chvkimo:推leftt的作法 (赶时间的时候) 10/07 11:36
14F：→ chvkimo:但是我会再用个夹链袋装起来,不然时间久了可能要在雪堆 10/07 11:37
15F：→ chvkimo:里面找东西 10/07 11:37
16F：推 sGoat:蛋白的东西最好是一次做到完,除非你不太在意你的sample 10/07 15:19
17F：→ sGoat:很多人说实验做不出来往往是贪图小小的方便而偷懒 10/07 15:20
18F：→ sGoat:结果造成你後续实验的困难以及复杂度... 10/07 15:21
19F：→ sGoat:一句老话: 你如何对待你的实验,它就给你相对的结果 10/07 15:23