作者besiege (旅行的意義)
看板Biotech
標題[求救] 想請問免疫螢光染色 染兩個顏色的問題
時間Thu Oct 2 14:37:45 2008
不好意思，我想要請問一下
因為我的免疫螢光染色需要染兩個protein
一個是主要要看的target protein
另一個則是組織的specific marker
所以就會染兩個顏色
一個是染紅光
一個是染綠光
兩個抗體的宿主來源不一樣
我試過將兩個抗體一起用Ab solution dilute
然後同時加玻片上
也試過分開dliute 等主要target protein的Ab overnight之後
再染第二個Ab 室溫2hr
但是在最後拍照的時候
兩種方法的結果和先前的單獨染一個抗體的結果相比
綠光的target protein的aggregation
就會變得比先前單獨染綠光(只加一個抗體)時還不明顯很多
請問有沒有人同時染過兩個螢光
那在條件上應該要如何更改比較好呢?
先謝謝大家了!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.177.113
1F：推 sisyphus:建議這一類問題把抗體名字清楚寫上來 討論起來比較方便 10/02 14:59
2F：→ sisyphus:比如說 1st: mouse IgG α human ProI (tissue marker) 10/02 15:02
3F：推 jsi:若只看您的敘述 我覺得在同時雙染時 可將綠光抗體濃度增加 10/02 22:55
4F：→ jsi:有時單染與雙染的最佳稀釋倍數會有差異 要titrate看看結果 10/02 22:56