作者besiege (旅行的意义)
看板Biotech
标题[求救] 想请问免疫萤光染色 染两个颜色的问题
时间Thu Oct 2 14:37:45 2008
不好意思，我想要请问一下
因为我的免疫萤光染色需要染两个protein
一个是主要要看的target protein
另一个则是组织的specific marker
所以就会染两个颜色
一个是染红光
一个是染绿光
两个抗体的宿主来源不一样
我试过将两个抗体一起用Ab solution dilute
然後同时加玻片上
也试过分开dliute 等主要target protein的Ab overnight之後
再染第二个Ab 室温2hr
但是在最後拍照的时候
两种方法的结果和先前的单独染一个抗体的结果相比
绿光的target protein的aggregation
就会变得比先前单独染绿光(只加一个抗体)时还不明显很多
请问有没有人同时染过两个萤光
那在条件上应该要如何更改比较好呢?
先谢谢大家了!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.177.113
1F：推 sisyphus:建议这一类问题把抗体名字清楚写上来 讨论起来比较方便 10/02 14:59
2F：→ sisyphus:比如说 1st: mouse IgG α human ProI (tissue marker) 10/02 15:02
3F：推 jsi:若只看您的叙述 我觉得在同时双染时 可将绿光抗体浓度增加 10/02 22:55
4F：→ jsi:有时单染与双染的最佳稀释倍数会有差异 要titrate看看结果 10/02 22:56