作者hellolady (癡肥宅男)
看板Biotech
標題[求救] HPLC初學者的疑問
時間Tue Sep 23 19:36:00 2008
各位前輩,
小弟我最近要使用Luna的HILIC column去分析維生素C,
我在廠商提供的目錄上找到了分析方法,
它的Mobile Phase是由A/B/C三種溶液混合,
但混合的比例我看得並不是很懂,
目錄上寫到...
A/B/C (90:5:5) for 2.5 min to A/B/C (50:45:5) in 7.5 min, hold for 2.5 min.
Re-equilibrate @ A/B/C (90:5:5) for 7.5 min
因為我對HPLC算是初學,
所以對上面文字的意思並不是很確定,
目錄上維生素C的peak是在5-6分鐘之間出現,
那是否我A/B/C該以50:45:5的比例混合?
另外對於HPLC的分析原理還有column的選用等相關資訊,
對初學者的我來說該怎麼去著手會比較好?
麻煩各位前輩解答,
謝謝!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.156.157
1F：推 Redwar:Mobile Phase：A/B/C溶液比例是梯度變化？ 09/23 19:53
2F：→ hellolady:A:acetonitrile B:water C:ammonium acetate 09/23 19:57
3F：→ hellolady:請問梯度變化的意思是..? 09/23 19:59
4F：推 Redwar:用程式在7.5分鐘內，從90:5:5跑到50:45:5比例 09/23 20:09
5F：→ hellolady:剛在網路上看了一下,發現pump有分單一solvent和踢度兩種 09/23 20:50
6F：→ hellolady:實驗室的是單一的,不知道這樣是否需要重找mobile phase? 09/23 20:52
7F：→ hellolady:若是我直接配製A/B/C(90:5:5)去跑,這樣可行嗎? 09/23 20:54
8F：推 higamanami:不行 他這樣應該為了peak shape 若機器不能跑梯度 09/23 20:58
9F：→ higamanami:只好另外找isocratic的移動相 09/23 20:58
10F：→ hellolady:感謝各位大大的解答 謝謝 09/23 21:18
11F：推 cypher0623:這是跑變化梯度，先90:5:5跑2.5min，再以7.5分鐘變換成 09/26 15:43
12F：→ cypher0623:50:45:5(通常是直線變化)，接著再跳回90:5:5原始比例， 09/26 15:45
13F：→ cypher0623:用7.5min平衡管柱 09/26 15:46