作者hellolady (痴肥宅男)
看板Biotech
标题[求救] HPLC初学者的疑问
时间Tue Sep 23 19:36:00 2008
各位前辈,
小弟我最近要使用Luna的HILIC column去分析维生素C,
我在厂商提供的目录上找到了分析方法,
它的Mobile Phase是由A/B/C三种溶液混合,
但混合的比例我看得并不是很懂,
目录上写到...
A/B/C (90:5:5) for 2.5 min to A/B/C (50:45:5) in 7.5 min, hold for 2.5 min.
Re-equilibrate @ A/B/C (90:5:5) for 7.5 min
因为我对HPLC算是初学,
所以对上面文字的意思并不是很确定,
目录上维生素C的peak是在5-6分钟之间出现,
那是否我A/B/C该以50:45:5的比例混合?
另外对於HPLC的分析原理还有column的选用等相关资讯,
对初学者的我来说该怎麽去着手会比较好?
麻烦各位前辈解答,
谢谢!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.156.157
1F：推 Redwar:Mobile Phase：A/B/C溶液比例是梯度变化？ 09/23 19:53
2F：→ hellolady:A:acetonitrile B:water C:ammonium acetate 09/23 19:57
3F：→ hellolady:请问梯度变化的意思是..? 09/23 19:59
4F：推 Redwar:用程式在7.5分钟内，从90:5:5跑到50:45:5比例 09/23 20:09
5F：→ hellolady:刚在网路上看了一下,发现pump有分单一solvent和踢度两种 09/23 20:50
6F：→ hellolady:实验室的是单一的,不知道这样是否需要重找mobile phase? 09/23 20:52
7F：→ hellolady:若是我直接配制A/B/C(90:5:5)去跑,这样可行吗? 09/23 20:54
8F：推 higamanami:不行 他这样应该为了peak shape 若机器不能跑梯度 09/23 20:58
9F：→ higamanami:只好另外找isocratic的移动相 09/23 20:58
10F：→ hellolady:感谢各位大大的解答 谢谢 09/23 21:18
11F：推 cypher0623:这是跑变化梯度，先90:5:5跑2.5min，再以7.5分钟变换成 09/26 15:43
12F：→ cypher0623:50:45:5(通常是直线变化)，接着再跳回90:5:5原始比例， 09/26 15:45
13F：→ cypher0623:用7.5min平衡管柱 09/26 15:46