作者bagagirl (就是愛發呆)
看板Biotech
標題[求救] 請幫我看一下我的subculture方法
時間Mon Sep 22 21:19:07 2008
我養的細胞是貼附型，用flask養
以下是我的流程:
抽出舊的medium
加入PBS 搖一下
抽掉PBS
加入trypsin
過一下下細胞都快要漂的時候加入新鮮medium沖下細胞
pipet幾次後 抽置tube (不吐光 留最後一點點計算細胞數)
離心
倒掉上清液 蓋好蓋子 敲散細胞團
加入medium votex
抽至flask
過程中都是無菌操作
液體都沒有碰到瓶口
也確定medium、PBS、trypsin等等都是無菌的
但是卻還是污染了........
有沒有哪一步驟是有問題的呢?
另外
請問一下喔
同一個incubator 同一層
有一個flask的細胞大汙染
那麼同層的細胞也會汙染嗎??
我已經搞不清楚到底是我的流程有問題...還是真的是被傳染的...
唉 挫折感好大>"<
請賜教<(_ _)>
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 122.117.172.169
1F：推 mtdas:沒在旁邊看你操作 應該無法判斷吧 會不會傳染要看汙染源是啥 09/22 21:24
2F：→ mtdas:不過怎會有vortex這個動作? 是什麼細胞啊? 09/22 21:25
3F：→ bagagirl:那個大汙染的是黴菌+yeast 我被汙染的是yeast 09/22 21:25
4F：→ mtdas:黴菌好像還蠻會傳的.. 09/22 21:35
5F：推 tangjj:yeast 污染就直接丟了 殺不完的 09/22 21:54
6F：推 aceliang:vortex...學長都說這樣細胞會暈車XD 09/22 23:17
7F：→ tsubasawolfy:vortex要看細胞株 PC3這傢伙用最高速震個20次還是 09/22 23:21
8F：→ tsubasawolfy:大吃大喝根本不會死 嬌嫩的LNCaP震個一次就回去了 09/22 23:21
9F：推 tincta:我有聽過用glass piptte但清洗有問題因而污染的案例這樣 09/23 00:57
10F：推 humwang:檢查一下你的trypsin,PBS,也許是這兩個污染了... 09/23 05:48
11F：推 chvkimo:同一個培養箱 如果也有其他人污染 應該就是互傳吧! 09/23 06:29
12F：推 zoom8080:CO2有加hepa filter嗎? 09/23 11:55