作者bagagirl (就是爱发呆)
看板Biotech
标题[求救] 请帮我看一下我的subculture方法
时间Mon Sep 22 21:19:07 2008
我养的细胞是贴附型，用flask养
以下是我的流程:
抽出旧的medium
加入PBS 摇一下
抽掉PBS
加入trypsin
过一下下细胞都快要漂的时候加入新鲜medium冲下细胞
pipet几次後 抽置tube (不吐光 留最後一点点计算细胞数)
离心
倒掉上清液 盖好盖子 敲散细胞团
加入medium votex
抽至flask
过程中都是无菌操作
液体都没有碰到瓶口
也确定medium、PBS、trypsin等等都是无菌的
但是却还是污染了........
有没有哪一步骤是有问题的呢?
另外
请问一下喔
同一个incubator 同一层
有一个flask的细胞大污染
那麽同层的细胞也会污染吗??
我已经搞不清楚到底是我的流程有问题...还是真的是被传染的...
唉 挫折感好大>"<
请赐教<(_ _)>
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 122.117.172.169
1F：推 mtdas:没在旁边看你操作 应该无法判断吧 会不会传染要看污染源是啥 09/22 21:24
2F：→ mtdas:不过怎会有vortex这个动作? 是什麽细胞啊? 09/22 21:25
3F：→ bagagirl:那个大污染的是霉菌+yeast 我被污染的是yeast 09/22 21:25
4F：→ mtdas:霉菌好像还蛮会传的.. 09/22 21:35
5F：推 tangjj:yeast 污染就直接丢了 杀不完的 09/22 21:54
6F：推 aceliang:vortex...学长都说这样细胞会晕车XD 09/22 23:17
7F：→ tsubasawolfy:vortex要看细胞株 PC3这家伙用最高速震个20次还是 09/22 23:21
8F：→ tsubasawolfy:大吃大喝根本不会死 娇嫩的LNCaP震个一次就回去了 09/22 23:21
9F：推 tincta:我有听过用glass piptte但清洗有问题因而污染的案例这样 09/23 00:57
10F：推 humwang:检查一下你的trypsin,PBS,也许是这两个污染了... 09/23 05:48
11F：推 chvkimo:同一个培养箱 如果也有其他人污染 应该就是互传吧! 09/23 06:29
12F：推 zoom8080:CO2有加hepa filter吗? 09/23 11:55