作者kane0419 (╮（╯_╰）╭)
看板Biotech
標題[問題] 限制 酉每 保有活性的時間？
時間Sun Sep 21 20:03:45 2008
最近在做clone
使用限制 酉每 作DNA的切割都沒有辦法作用的很完全
導致我想要的目標DNA片段量很少
但是電泳結果卻有很亮的band在上方
想問一下 酵素保有活性的時間大約是多少？
因為我每次作兩小時的反應 切割都結果都不太好
我想拉長作用的時間
但是不想多等酵素已經失活的時間(ex:有活性12hr,卻等了24hr)
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◆ From: 140.122.152.150
1F：→ hibioman:應該是buffer的問題吧!! buffer對，切2小時效率應該有95% 09/21 20:10
2F：推 blence:應該不是切不完全,而是target過小,亮度跟vector肯定差很多 09/21 20:50
3F：推 hibioman:推樓上 的確有可能是此情形 09/21 21:14
4F：→ kane0419:但應該只有a,b,c三片段 卻多跑出a+b之類的 這該怎麼辦呢 09/21 22:46
5F：推 hibioman:用哪種酵素切? 是哪種Buffer? 09/22 00:19
6F：→ kane0419:我遇到不少個 不曉得是不是酵素失活還是怎樣 09/22 01:10
7F：→ kane0419:老是會跑出一些該切卻沒有切的片段 09/22 01:11
8F：→ sGoat:使用方法應該有說到切16小時的方法,何不試試看... 09/23 11:07
9F：推 nurseteresa:把sample跟限制?的量放大，效果會比較好些 09/24 13:24