作者kane0419 (╮(╯_╰)╭)
看板Biotech
标题[问题] 限制 酉每 保有活性的时间?
时间Sun Sep 21 20:03:45 2008
最近在做clone
使用限制 酉每 作DNA的切割都没有办法作用的很完全
导致我想要的目标DNA片段量很少
但是电泳结果却有很亮的band在上方
想问一下 酵素保有活性的时间大约是多少?
因为我每次作两小时的反应 切割都结果都不太好
我想拉长作用的时间
但是不想多等酵素已经失活的时间(ex:有活性12hr,却等了24hr)
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╮(╯_╰)╭
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.122.152.150
1F:→ hibioman:应该是buffer的问题吧!! buffer对,切2小时效率应该有95% 09/21 20:10
2F:推 blence:应该不是切不完全,而是target过小,亮度跟vector肯定差很多 09/21 20:50
3F:推 hibioman:推楼上 的确有可能是此情形 09/21 21:14
4F:→ kane0419:但应该只有a,b,c三片段 却多跑出a+b之类的 这该怎麽办呢 09/21 22:46
5F:推 hibioman:用哪种酵素切? 是哪种Buffer? 09/22 00:19
6F:→ kane0419:我遇到不少个 不晓得是不是酵素失活还是怎样 09/22 01:10
7F:→ kane0419:老是会跑出一些该切却没有切的片段 09/22 01:11
8F:→ sGoat:使用方法应该有说到切16小时的方法,何不试试看... 09/23 11:07
9F:推 nurseteresa:把sample跟限制?的量放大,效果会比较好些 09/24 13:24