作者rita1986 (朝目標邁進)
看板Biotech
標題Re: [求救] insert切不出來
時間Sun Sep 21 18:53:33 2008
※ 引述《rita1986 (朝目標邁進)》之銘言：
已經將 target sequence clone 到 pGEM-T-easy
有定序過序列和 cut site 都沒問題
但做 digest 時一直切不出 insert
兩端都是 BglII 的切位
確認過 enzyme 和抽 mini 的 plasmid size 是沒問題的
想請問會不會是我的切位附近的序列會形成啥結構或被修飾
才切不了
有可以預測的程式嗎
謝謝
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◆ From: 140.129.77.148
1F：推 bicon:有放positive control嗎? 確認enzyme或buffer沒問題 09/21 17:34
有拿確定可切出 band 的 plasmid 確認過 enzyme 和 buffer 沒問題
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◆ From: 61.217.128.229
2F：推 hibioman:plasmid抽完，保存液是什麼? 純水? TE? 09/21 20:17
3F：→ rita1986:是純水 09/21 21:07
4F：推 sGoat:如果是PCR完的產物clone到vector裡應該不會有修飾作用吧 09/23 11:05