作者rita1986 (朝目标迈进)
看板Biotech
标题Re: [求救] insert切不出来
时间Sun Sep 21 18:53:33 2008
※ 引述《rita1986 (朝目标迈进)》之铭言：
已经将 target sequence clone 到 pGEM-T-easy
有定序过序列和 cut site 都没问题
但做 digest 时一直切不出 insert
两端都是 BglII 的切位
确认过 enzyme 和抽 mini 的 plasmid size 是没问题的
想请问会不会是我的切位附近的序列会形成啥结构或被修饰
才切不了
有可以预测的程式吗
谢谢
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◆ From: 140.129.77.148
1F：推 bicon:有放positive control吗? 确认enzyme或buffer没问题 09/21 17:34
有拿确定可切出 band 的 plasmid 确认过 enzyme 和 buffer 没问题
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◆ From: 61.217.128.229
2F：推 hibioman:plasmid抽完，保存液是什麽? 纯水? TE? 09/21 20:17
3F：→ rita1986:是纯水 09/21 21:07
4F：推 sGoat:如果是PCR完的产物clone到vector里应该不会有修饰作用吧 09/23 11:05