作者rita1986 (朝目標邁進)
看板Biotech
標題[求救] insert切不出來
時間Sun Sep 21 16:40:29 2008
已經將 target sequence clone 到 pGEM-T-easy
有定序過序列和 cut site 都沒問題
但做 digest 時一直切不出 insert
兩端都是 BglII 的切位
確認過 enzyme 和抽 mini 的 plasmid size 是沒問題的
想請問會不會是我的切位附近的序列會形成啥結構或被修飾
才切不了
有可以預測的程式嗎
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.77.148
1F：推 bicon:有放positive control嗎? 確認enzyme或buffer沒問題 09/21 17:34
2F：推 blence:請問你的insert多大?gel確認時有沒可參照未切的位置?取多少 09/21 19:25
3F：→ blence:切跑plasmid? 是如何,gel與%? 來確認BglII切完的結果? 09/21 19:27