作者rita1986 (朝目标迈进)
看板Biotech
标题[求救] insert切不出来
时间Sun Sep 21 16:40:29 2008
已经将 target sequence clone 到 pGEM-T-easy
有定序过序列和 cut site 都没问题
但做 digest 时一直切不出 insert
两端都是 BglII 的切位
确认过 enzyme 和抽 mini 的 plasmid size 是没问题的
想请问会不会是我的切位附近的序列会形成啥结构或被修饰
才切不了
有可以预测的程式吗
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.77.148
1F：推 bicon:有放positive control吗? 确认enzyme或buffer没问题 09/21 17:34
2F：推 blence:请问你的insert多大?gel确认时有没可参照未切的位置?取多少 09/21 19:25
3F：→ blence:切跑plasmid? 是如何,gel与%? 来确认BglII切完的结果? 09/21 19:27