作者charlielg (chi)
看板Biotech
標題Re: [求救]pcr 問題?
時間Thu Sep 18 10:03:40 2008
※ 引述《charlielg (chi)》之銘言：
: 是否可以利用pcr方法,將三段DNA序列連接起來成一段?
: PS:這三段DNA序列兩兩之間有重疊序列
想再請問一下在整個pcr過程中template與primer添加細節與pcr條件是如何?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.155.210
1F：→ alaric:跟一般PCR一樣吧, 至少我是如此弄出兩段合一. 09/18 19:33
2F：推 honny7410:我是用taq，跑了兩次，第一次沒加template，跑7cycles 09/19 19:49
3F：→ honny7410:annealing溫度才50度而已（我的sample溫度設高反而有雜 09/19 19:50
4F：→ honny7410:band）第二次再加入primer，條件如一般pcr 09/19 19:51
5F：→ honny7410:上面template打錯，是primer，抱歉… 09/19 19:51
6F：→ honny7410:實驗室學姊也有直接一次把兩股template和primer一起加入 09/19 19:52
7F：→ honny7410:可以跑得出來 09/19 19:53
8F：推 alaric:我自己的也是前兩段, template和primer一起加入, 就可以. 09/20 02:55
9F：→ alaric:然而, 後兩段一起加, 就不行... 09/20 02:55
10F：→ alaric:其實我的目標是三段一起加入, 一次P完一整條.. 09/20 02:56
11F：→ alaric:paper上, 畫的簡單, 還是列了九段, 一次完成的理想圖... 09/20 02:57