作者charlielg (chi)
看板Biotech
标题Re: [求救]pcr 问题?
时间Thu Sep 18 10:03:40 2008
※ 引述《charlielg (chi)》之铭言：
: 是否可以利用pcr方法,将三段DNA序列连接起来成一段?
: PS:这三段DNA序列两两之间有重叠序列
想再请问一下在整个pcr过程中template与primer添加细节与pcr条件是如何?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.155.210
1F：→ alaric:跟一般PCR一样吧, 至少我是如此弄出两段合一. 09/18 19:33
2F：推 honny7410:我是用taq，跑了两次，第一次没加template，跑7cycles 09/19 19:49
3F：→ honny7410:annealing温度才50度而已（我的sample温度设高反而有杂 09/19 19:50
4F：→ honny7410:band）第二次再加入primer，条件如一般pcr 09/19 19:51
5F：→ honny7410:上面template打错，是primer，抱歉… 09/19 19:51
6F：→ honny7410:实验室学姊也有直接一次把两股template和primer一起加入 09/19 19:52
7F：→ honny7410:可以跑得出来 09/19 19:53
8F：推 alaric:我自己的也是前两段, template和primer一起加入, 就可以. 09/20 02:55
9F：→ alaric:然而, 後两段一起加, 就不行... 09/20 02:55
10F：→ alaric:其实我的目标是三段一起加入, 一次P完一整条.. 09/20 02:56
11F：→ alaric:paper上, 画的简单, 还是列了九段, 一次完成的理想图... 09/20 02:57