作者TINNYCAT ( 喵喵)
看板Biotech
標題[求救] 蝦血 RNA 抽取方式
時間Tue Sep 16 17:15:08 2008
板上好像很少人在做蝦血阿@@
我目前是使用Qiagen的RNeasy Micro Kit
先將蝦血離心沉澱pellet後(2cc蝦血只能離出約1mm-2mm pellet)
在加入kit中的RNA later
在做後續的Kit步驟
可能是限於Kit的Maximum binding capacity只有45 μg RNA (handbook上寫的)
但是我純化出的RNA通常conc.僅有0.25μg/μl (總體積10μl左右)
不知道是不是因為pellet太小的問題？
A260/A280的純度倒是很不錯 (1.9-2.0左右)
Ps. sample之後是要用來做Microarray的,如果有前輩是用其他的處理方法，
可以麻煩教我一下嗎Orz
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.170.76
1F：推 naturer:抽完可以烤來吃嗎 09/16 19:16
2F：→ TINNYCAT:= = 實驗組是下過藥的 你要烤我是無所謂啦XD 09/16 19:30
3F：推 sisyphus:對照組!!!對照組!!!!!! 09/16 19:44
4F：→ TINNYCAT:Orz 先幫我解決問題就給你吃XD 09/16 19:45
5F：推 ookubo:想當年..實驗室取眼柄而已...剩下的抹鹽微波來吃...:p美味~ 09/16 20:26
6F：→ ookubo:整盤整盤的草蝦...一盤一盤的取眼柄，旁人一盤一盤的煮來吃 09/16 20:27
7F：→ ookubo:一般過kit的量都會比較少，可以直接用TRIZol抽嗎？ 09/16 20:28
8F：→ TINNYCAT:因為是蝦血的血球pellet,所以sample量很少 09/16 20:30
9F：→ TINNYCAT:我之前用TRIZol抽 量多 但是純度比較低Orz 09/16 20:31
10F：推 ookubo:Q的那個kit，是一樣通管子過膜再回溶出來嗎?? 09/16 21:04
11F：推 sisyphus:預期兩CC可以抽多少RNA出來啊 又45μg還不錯多啊 要不要 09/16 22:25
12F：→ sisyphus:用trizol直接抽抽看 09/16 22:25
13F：推 ookubo:最後一步是不是也是用水把bind在膜上的RNA回溶出來呢？ 09/16 22:26
14F：→ ookubo:那可不可以用一點溫水(~30-40度C)的水回溶，有沒有可能提高 09/16 22:26
15F：→ ookubo:elute出來的量呢~? 溶解度增加 這方法可行嗎？ 09/16 22:27
16F：→ TINNYCAT:感謝大家的建議，我來去試試看之後再來報告成果^^ 09/16 23:01
17F：推 ookubo:那...我們幾個推文的 可以分幾隻對照組??? :D 09/16 23:02
18F：推 nixo:想到當年上實驗課吃牡蠣。實驗只用到幾隻，助教買一大麻袋。 09/16 23:25
19F：推 ookubo:懷念...好幾個臉盆裝的10斤白蝦..用大桶子裝吃不完的九孔.. 09/16 23:42
20F：→ ookubo:還有合作代養的業者請各式各樣的海鮮...媽呀..流口水了.. 09/16 23:42
21F：→ TINNYCAT:待我瞧瞧實驗結果咩XDDD 09/17 00:12
22F：推 naturer:跟老闆說要做龍蝦拉,血多!! 09/17 11:46
23F：推 sharkcell:沒錯~~龍蝦血多!!!\($O$)/我要龍蝦對照組XD 09/17 12:03
24F：→ sisyphus:龍蝦這種便宜貨 我來處理就好了 09/17 12:09
25F：→ TINNYCAT:= =龍蝦成本好厚 Orz 09/17 12:51
26F：推 dankai:羨慕這種吃不完蝦子感覺的實驗@@~~ 09/17 13:05
27F：→ TINNYCAT:<==做實驗的本人為了實驗順利完全不敢吃蝦 Orz 09/17 13:56
28F：推 ookubo:沒錯沒錯 所以當年我都幫別人做這種實驗 我自己偏選金魚 :D 09/17 19:23
29F：推 daniel2806:討論好熱烈阿~~喵喵 有離題之fu 09/18 00:51
30F：→ TINNYCAT:我哪知道那麼多人愛吃蝦= = 該不會整篇推文其實都是熟人 09/18 04:17
31F：→ TINNYCAT:吧 Orz 09/18 04:17
32F：推 ookubo:其實 我很愛吃海鮮 魚蝦貝都愛...但是那次有個業者請我們吃 09/18 21:16
33F：→ ookubo:中餐時，發現我們拼命吃蝦，他就說，這個沒有我養的好吃... 09/18 21:16
34F：→ ookubo:然後 就打電話交代一下....我們回到漁塭時...等待著我們的. 09/18 21:17
35F：→ ookubo:10斤的白蝦...加點蒜頭水煮...一臉盆一臉盆的送上桌.... 09/18 21:18
36F：→ ookubo:冰箱有拿不完的啤酒跟水...就這樣 整個下午聊天喝酒吃白蝦. 09/18 21:18
37F：→ ookubo:傍晚回程時，大哥拿著裝滿臉盆的白蝦..路上邊開邊吃啦.. 09/18 21:19
38F：→ ookubo:自此...我整整大約一年不敢再吃白蝦... :D 09/18 21:20
39F：→ ookubo:回想那天...整張桌子擺滿了蝦殼....看官..你們能想像嗎？ 09/18 21:21
40F：推 daniel2806:這會中毒吧?? 養殖藥物殘留 09/19 00:32
41F：推 sGoat:比起那個,會酒精中毒先XDXD 09/19 08:25
42F：推 ookubo:樓上的~您真內行!!! XD 09/20 07:36