作者TINNYCAT ( 喵喵)
看板Biotech
标题[求救] 虾血 RNA 抽取方式
时间Tue Sep 16 17:15:08 2008
板上好像很少人在做虾血阿@@
我目前是使用Qiagen的RNeasy Micro Kit
先将虾血离心沉淀pellet後(2cc虾血只能离出约1mm-2mm pellet)
在加入kit中的RNA later
在做後续的Kit步骤
可能是限於Kit的Maximum binding capacity只有45 μg RNA (handbook上写的)
但是我纯化出的RNA通常conc.仅有0.25μg/μl (总体积10μl左右)
不知道是不是因为pellet太小的问题？
A260/A280的纯度倒是很不错 (1.9-2.0左右)
Ps. sample之後是要用来做Microarray的,如果有前辈是用其他的处理方法，
可以麻烦教我一下吗Orz
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.170.76
1F：推 naturer:抽完可以烤来吃吗 09/16 19:16
2F：→ TINNYCAT:= = 实验组是下过药的 你要烤我是无所谓啦XD 09/16 19:30
3F：推 sisyphus:对照组!!!对照组!!!!!! 09/16 19:44
4F：→ TINNYCAT:Orz 先帮我解决问题就给你吃XD 09/16 19:45
5F：推 ookubo:想当年..实验室取眼柄而已...剩下的抹盐微波来吃...:p美味~ 09/16 20:26
6F：→ ookubo:整盘整盘的草虾...一盘一盘的取眼柄，旁人一盘一盘的煮来吃 09/16 20:27
7F：→ ookubo:一般过kit的量都会比较少，可以直接用TRIZol抽吗？ 09/16 20:28
8F：→ TINNYCAT:因为是虾血的血球pellet,所以sample量很少 09/16 20:30
9F：→ TINNYCAT:我之前用TRIZol抽 量多 但是纯度比较低Orz 09/16 20:31
10F：推 ookubo:Q的那个kit，是一样通管子过膜再回溶出来吗?? 09/16 21:04
11F：推 sisyphus:预期两CC可以抽多少RNA出来啊 又45μg还不错多啊 要不要 09/16 22:25
12F：→ sisyphus:用trizol直接抽抽看 09/16 22:25
13F：推 ookubo:最後一步是不是也是用水把bind在膜上的RNA回溶出来呢？ 09/16 22:26
14F：→ ookubo:那可不可以用一点温水(~30-40度C)的水回溶，有没有可能提高 09/16 22:26
15F：→ ookubo:elute出来的量呢~? 溶解度增加 这方法可行吗？ 09/16 22:27
16F：→ TINNYCAT:感谢大家的建议，我来去试试看之後再来报告成果^^ 09/16 23:01
17F：推 ookubo:那...我们几个推文的 可以分几只对照组??? :D 09/16 23:02
18F：推 nixo:想到当年上实验课吃牡蛎。实验只用到几只，助教买一大麻袋。 09/16 23:25
19F：推 ookubo:怀念...好几个脸盆装的10斤白虾..用大桶子装吃不完的九孔.. 09/16 23:42
20F：→ ookubo:还有合作代养的业者请各式各样的海鲜...妈呀..流口水了.. 09/16 23:42
21F：→ TINNYCAT:待我瞧瞧实验结果咩XDDD 09/17 00:12
22F：推 naturer:跟老板说要做龙虾拉,血多!! 09/17 11:46
23F：推 sharkcell:没错~~龙虾血多!!!\($O$)/我要龙虾对照组XD 09/17 12:03
24F：→ sisyphus:龙虾这种便宜货 我来处理就好了 09/17 12:09
25F：→ TINNYCAT:= =龙虾成本好厚 Orz 09/17 12:51
26F：推 dankai:羡慕这种吃不完虾子感觉的实验@@~~ 09/17 13:05
27F：→ TINNYCAT:<==做实验的本人为了实验顺利完全不敢吃虾 Orz 09/17 13:56
28F：推 ookubo:没错没错 所以当年我都帮别人做这种实验 我自己偏选金鱼 :D 09/17 19:23
29F：推 daniel2806:讨论好热烈阿~~喵喵 有离题之fu 09/18 00:51
30F：→ TINNYCAT:我哪知道那麽多人爱吃虾= = 该不会整篇推文其实都是熟人 09/18 04:17
31F：→ TINNYCAT:吧 Orz 09/18 04:17
32F：推 ookubo:其实 我很爱吃海鲜 鱼虾贝都爱...但是那次有个业者请我们吃 09/18 21:16
33F：→ ookubo:中餐时，发现我们拼命吃虾，他就说，这个没有我养的好吃... 09/18 21:16
34F：→ ookubo:然後 就打电话交代一下....我们回到渔塭时...等待着我们的. 09/18 21:17
35F：→ ookubo:10斤的白虾...加点蒜头水煮...一脸盆一脸盆的送上桌.... 09/18 21:18
36F：→ ookubo:冰箱有拿不完的啤酒跟水...就这样 整个下午聊天喝酒吃白虾. 09/18 21:18
37F：→ ookubo:傍晚回程时，大哥拿着装满脸盆的白虾..路上边开边吃啦.. 09/18 21:19
38F：→ ookubo:自此...我整整大约一年不敢再吃白虾... :D 09/18 21:20
39F：→ ookubo:回想那天...整张桌子摆满了虾壳....看官..你们能想像吗？ 09/18 21:21
40F：推 daniel2806:这会中毒吧?? 养殖药物残留 09/19 00:32
41F：推 sGoat:比起那个,会酒精中毒先XDXD 09/19 08:25
42F：推 ookubo:楼上的~您真内行!!! XD 09/20 07:36