作者oldduck0906 (舞動人生...)
看板Biotech
標題[求救] DNA agarose gel
時間Thu Aug 28 15:45:38 2008
恩...
小的以agarose gel 來check RT-PCR的產物
但是我的DNA有些跑的不是很乾淨
我要看的片段是可以看到
但仍有部分DNA卡在 well 上跑不下來
請問這樣是正常的嗎?
這樣比較表現量的話會不會不準阿
還是PCR的條件還要再抓?
亦或是其他因素...
感謝大家~
第一次PO文 多多指教
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.77.155
1F：推 sGoat:表現量除非你用RT-PCR又定量過,不然DNA P出來不能比表現量 08/28 16:53
2F：推 ookubo:就傳統半定量粗估，不是很準就是了...做個internal ctrl吧 08/28 17:00
3F：推 sGoat:除非你轉mRNA=>cDNA 不然沒有所謂基因表現,只是copy number 08/28 17:19
4F：推 ookubo:原PO是說他用RT-PCR產物...就是mRNA-->cDNA看表現量啦~! 08/28 17:54
5F：推 sGoat:SORRY 眼殘了@@ 08/28 18:10
6F：推 sGoat:請問是不是template加太多阿? 08/28 21:56
7F：推 zoom8080:膠太濃? 08/29 00:27
8F：推 dankai:我們實驗室學長也有這個問題~也查不到原因!! 08/29 00:28
9F：→ oldduck0906: 2% gel。可是是paper上建議的。 08/29 15:00
10F：推 sGoat:把well裡面的水吸乾看看,有時候是裡面的反光看錯@@ 08/29 15:14