作者albertwang (會思考的魚)
看板Biotech
標題Re: [求救]請問PCR products用restriction enzymeꐠ…
時間Thu Aug 14 09:44:54 2008
※ 引述《calmato (Anita~)》之銘言：
: 不好意思~我是這篇文章真正的發問者
: 關於primer我是照廠商給的單子上面有寫該加多少水而去稀釋的
: 所以如果是濃度太高~我還可以自行稀釋嗎?
通常廠商給的都是儲放的濃度不是working的濃度
: 另外~是有老師教我要去切前做純化~但他教的方式是使用一種
: 濾紙將pcr products 滴上去幾秒再吸回來~這樣的確是會loss
: 掉不少的sample 而且非常耗時~他說這樣的目的只是去除掉一些
: 鹽類~~但又由於我的sample量之大~我真的沒有心力再一管一管
: 的去做這樣的事~(但如果各位的建意是最好還是做的話~那我還是
: 就會乖乖的做這步驟)
妳老師用的方法沒錯因為這樣不用浪費純化kit的錢
如果你量太多的話可以考慮用酒精沉澱
我以前做過96*8的量是去做sequencing
不用ㄧ個小時
還有你的問題應該還有粉多
不過你這樣問法沒濃度沒用量要知道問題在哪滿難的
所以你把你反應的條件poㄧ下那才能知道你的問題
: 因此，以上~不知各位前輩有沒有什麼覺得小妹我該注意或該做些
: 什麼?請不吝指較~感激不盡!!
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◆ From: 140.114.96.242
1F：推 sGoat:會用濾紙是因為體積(單一樣本)超過機器可以離心的容量了吧 08/14 10:39
2F：推 sGoat:要是單一樣本量太大,先沉澱抽乾,再用少一點體積的水回溶 08/14 10:43
3F：→ sGoat:就可以得到較濃的DNA stock,再去做後面的實驗... 08/14 10:44
4F：→ sGoat:抱歉忘了補,大體積離心要用到超高速離心G力才會夠,請注意... 08/14 10:45
5F：推 calmato:sorry~忘了說~我所說的sample大是指很多不同的樣本 08/14 11:06