作者albertwang (会思考的鱼)
看板Biotech
标题Re: [求救]请问PCR products用restriction enzymeꐠ…
时间Thu Aug 14 09:44:54 2008
※ 引述《calmato (Anita~)》之铭言：
: 不好意思~我是这篇文章真正的发问者
: 关於primer我是照厂商给的单子上面有写该加多少水而去稀释的
: 所以如果是浓度太高~我还可以自行稀释吗?
通常厂商给的都是储放的浓度不是working的浓度
: 另外~是有老师教我要去切前做纯化~但他教的方式是使用一种
: 滤纸将pcr products 滴上去几秒再吸回来~这样的确是会loss
: 掉不少的sample 而且非常耗时~他说这样的目的只是去除掉一些
: 盐类~~但又由於我的sample量之大~我真的没有心力再一管一管
: 的去做这样的事~(但如果各位的建意是最好还是做的话~那我还是
: 就会乖乖的做这步骤)
你老师用的方法没错因为这样不用浪费纯化kit的钱
如果你量太多的话可以考虑用酒精沉淀
我以前做过96*8的量是去做sequencing
不用ㄧ个小时
还有你的问题应该还有粉多
不过你这样问法没浓度没用量要知道问题在哪满难的
所以你把你反应的条件poㄧ下那才能知道你的问题
: 因此，以上~不知各位前辈有没有什麽觉得小妹我该注意或该做些
: 什麽?请不吝指较~感激不尽!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.96.242
1F：推 sGoat:会用滤纸是因为体积(单一样本)超过机器可以离心的容量了吧 08/14 10:39
2F：推 sGoat:要是单一样本量太大,先沉淀抽乾,再用少一点体积的水回溶 08/14 10:43
3F：→ sGoat:就可以得到较浓的DNA stock,再去做後面的实验... 08/14 10:44
4F：→ sGoat:抱歉忘了补,大体积离心要用到超高速离心G力才会够,请注意... 08/14 10:45
5F：推 calmato:sorry~忘了说~我所说的sample大是指很多不同的样本 08/14 11:06