作者a369512 (我不難過)
看板Biotech
標題[求救] 怎麼萃取在BL21裡的質體
時間Mon Jul 21 23:41:27 2008
最近在萃一個載體是在BL21裡面
其實是廠商附的要給我們做negative control
可是一直萃不太出來耶
就是膠片跑出來亮帶都會拖很長
我們是用lysozyme去打破菌
在做的時候感覺菌都沒被打破
請問要如何克服呢?
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◆ From: 123.252.17.230
1F：推 Invec:用一般的plasmid extraction kit應該就抽出來了 07/22 15:51
2F：推 yvan:BL21是low copy 所以看不到band,抽完plasmid後 直接transfom 07/23 18:05
3F：→ yvan:到別的菌吧 07/23 18:05
4F：推 blence:你太武斷了,我常於BL21再確認plasmid,用1~2cc菌液萃取後通 07/23 21:23
5F：→ blence:常不需純化就有50~100ng/mcl的濃度,怎會看不到band？ 07/23 21:24
6F：→ a369512:我們萃完還有用限制?去切，可是跑出來都沒東西，所以覺得 07/23 22:22
7F：→ a369512:是沒萃出來的關西 07/23 22:22
8F：→ a369512: 酉每 07/23 22:22
9F：推 daao1071:要抽plasmid就用plasmid extraction kit就行了 lysozyme 07/25 00:48
10F：→ daao1071:留著抽protein用吧 至少我用BL21覺得它copy number不是 07/25 00:49
11F：→ daao1071:最低的~ 07/25 00:49
12F：推 garybounce:BL21 最近一直retransform後抽質體再切 濃度都很夠阿. 07/26 23:38