作者a369512 (我不难过)
看板Biotech
标题[求救] 怎麽萃取在BL21里的质体
时间Mon Jul 21 23:41:27 2008
最近在萃一个载体是在BL21里面
其实是厂商附的要给我们做negative control
可是一直萃不太出来耶
就是胶片跑出来亮带都会拖很长
我们是用lysozyme去打破菌
在做的时候感觉菌都没被打破
请问要如何克服呢?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.252.17.230
1F：推 Invec:用一般的plasmid extraction kit应该就抽出来了 07/22 15:51
2F：推 yvan:BL21是low copy 所以看不到band,抽完plasmid後 直接transfom 07/23 18:05
3F：→ yvan:到别的菌吧 07/23 18:05
4F：推 blence:你太武断了,我常於BL21再确认plasmid,用1~2cc菌液萃取後通 07/23 21:23
5F：→ blence:常不需纯化就有50~100ng/mcl的浓度,怎会看不到band？ 07/23 21:24
6F：→ a369512:我们萃完还有用限制?去切，可是跑出来都没东西，所以觉得 07/23 22:22
7F：→ a369512:是没萃出来的关西 07/23 22:22
8F：→ a369512: 酉每 07/23 22:22
9F：推 daao1071:要抽plasmid就用plasmid extraction kit就行了 lysozyme 07/25 00:48
10F：→ daao1071:留着抽protein用吧 至少我用BL21觉得它copy number不是 07/25 00:49
11F：→ daao1071:最低的~ 07/25 00:49
12F：推 garybounce:BL21 最近一直retransform後抽质体再切 浓度都很够阿. 07/26 23:38