作者crement (cometoseeme)
看板Biotech
標題Re: [求救] 抽RNA使用DNase
時間Wed Jul 16 21:01:54 2008
※ 引述《TONY1 ( )》之銘言：
: 再抽RNA上面,原本學長都是使用Qiagen這套KIT
: 但我在使用後發現,這套KIT蠻好上手但其作DNase處理是在filter上
: 所以還是有些DNA殘留,但最大問題還是抽出來的total RNA量不夠多
: 所以有算用Trizol來做,我現在實驗主要是做RACE,找出cDNA全長
: 我想請問的是,一般大家再抽RNA會在特別用DNase處理,然後要如何除去
: 第二就是一般在做RACE時使用的total RNA會做DNase的處理嗎?
: 感謝大家的幫忙^^
1.一般RTPCR不需要處理，大部分QPCR也不需要。
去除DNASE的方法只有過COLUMN比較方便。
2.我覺得不需要，想問一下現在為什麼要作RACE啊？！
不是大部分的GENE都可以在database找到『全長』嗎？！
是特殊的物種還是什麼原因呢？！
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灌水灌的好辛苦！
什麼時候文章數才夠阿！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 125.230.64.50
1F：→ sisyphus:他不是要賽跑, race應該還是要吧; 大部分不是全部 07/17 00:34
2F：→ sisyphus:大部分也不是全部, 很多microRNA的表現也需要看 07/17 00:35
3F：推 TONY1:在databasea沒有,之後作表現量的分析,查了資料 07/17 02:03
4F：→ TONY1:似乎可以不處理,不過作RACE我還是怕...且希望RNA量多一點 07/17 02:05
5F：推 sGoat:你所謂的大部分基因,其實只是小部分歐,況且作的物種不同 07/17 03:12
6F：→ sGoat:其同源基因相似度也不是100%,解碼完畢的物種也只有那些而以 07/17 03:14
7F：→ sGoat:光是水稻就有好幾百種,每種基因又不完全相似,所以還是有必要 07/17 03:16
8F：→ sGoat:而且要注意到那些解碼完畢的只是得到其序列,很多還是 07/17 10:30
9F：→ sGoat:未知功能,只是根據序列分析判斷那裏有一段基因而已 07/17 10:31
10F：→ sGoat:對於未知的研究目標,能得到越多的資料是越好的籌碼 07/17 10:33