作者crement (cometoseeme)
看板Biotech
标题Re: [求救] 抽RNA使用DNase
时间Wed Jul 16 21:01:54 2008
※ 引述《TONY1 ( )》之铭言：
: 再抽RNA上面,原本学长都是使用Qiagen这套KIT
: 但我在使用後发现,这套KIT蛮好上手但其作DNase处理是在filter上
: 所以还是有些DNA残留,但最大问题还是抽出来的total RNA量不够多
: 所以有算用Trizol来做,我现在实验主要是做RACE,找出cDNA全长
: 我想请问的是,一般大家再抽RNA会在特别用DNase处理,然後要如何除去
: 第二就是一般在做RACE时使用的total RNA会做DNase的处理吗?
: 感谢大家的帮忙^^
1.一般RTPCR不需要处理，大部分QPCR也不需要。
去除DNASE的方法只有过COLUMN比较方便。
2.我觉得不需要，想问一下现在为什麽要作RACE啊？！
不是大部分的GENE都可以在database找到『全长』吗？！
是特殊的物种还是什麽原因呢？！
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灌水灌的好辛苦！
什麽时候文章数才够阿！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 125.230.64.50
1F：→ sisyphus:他不是要赛跑, race应该还是要吧; 大部分不是全部 07/17 00:34
2F：→ sisyphus:大部分也不是全部, 很多microRNA的表现也需要看 07/17 00:35
3F：推 TONY1:在databasea没有,之後作表现量的分析,查了资料 07/17 02:03
4F：→ TONY1:似乎可以不处理,不过作RACE我还是怕...且希望RNA量多一点 07/17 02:05
5F：推 sGoat:你所谓的大部分基因,其实只是小部分欧,况且作的物种不同 07/17 03:12
6F：→ sGoat:其同源基因相似度也不是100%,解码完毕的物种也只有那些而以 07/17 03:14
7F：→ sGoat:光是水稻就有好几百种,每种基因又不完全相似,所以还是有必要 07/17 03:16
8F：→ sGoat:而且要注意到那些解码完毕的只是得到其序列,很多还是 07/17 10:30
9F：→ sGoat:未知功能,只是根据序列分析判断那里有一段基因而已 07/17 10:31
10F：→ sGoat:对於未知的研究目标,能得到越多的资料是越好的筹码 07/17 10:33