作者chvkimo (達)
看板Biotech
標題[求救] 關於MNNG
時間Mon Jul 14 17:44:27 2008
N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG),
MNNG 是一種致突變劑,配製是使用DMSO回溶
由於先前學長(畢業以久)把一罐5g 以50mL DMSO回溶(679M)
保存在 4度C, 另外有使用PBS稀釋至6.79mM 再保存4度C
可能每次使用都拿 已稀釋過的.
但是最近看到一篇文章的使用方式是freshly made,內容如下
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N-Methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) (Sigma)
was dissolved in DMSO and was freshly made for each experiment.
For experiments involving MNNG, because of the short
half-life of MNNG (1 h), media were not replaced before cells
were harvested.
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想請問有碰過MNNG的大大,是要每次都拿出來秤重再以DMSO回溶嗎?
在DMSO裡是否很快就分解了呢?
因為這是很強的致突變劑,比較不希望常常拿出來秤.
謝謝~~
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◆ From: 163.25.94.184
※ 編輯: chvkimo 來自: 163.25.94.184 (07/14 17:59)
1F：推 konlon:liquid MNNG之half life約為1hr,所以藥用的時候要配新鮮的 07/14 18:50
2F：推 blence:alkylation agent很少這樣保存的,尤其這麼毒是不該每次秤重 07/14 19:57
3F：→ blence:DMSO在-20度C避光保存吧,如果你的final是在uM濃度下 07/14 20:00
4F：→ chvkimo:konlon大是直接翻譯嗎? 我是想問有經驗的人 07/14 20:01
※ 編輯: chvkimo 來自: 163.25.94.184 (07/14 20:02)
5F：→ chvkimo:回blence大,對阿 很毒,所以我也不想常常拿出來秤,主因是 07/14 20:04
6F：→ chvkimo:之前學長一直冰在4度C(不過應該是mM的),但是看到這篇paper 07/14 20:06
7F：→ chvkimo:又寫半衰期只有一小時,所以應該跟你的想法差不多 謝謝 07/14 20:07
8F：→ chvkimo:不過還是謝謝上面兩位提供想法 07/14 20:07
9F：→ chvkimo:發這篇文最主要是想問看看用過MNNG的人的經驗 07/14 20:08
10F：推 konlon:我用過 paper都說要fresh prepare 07/14 21:12
11F：推 wallpaper:我有疑問(舉手)...我每次只用1 lamda 怎麼fresh prepare 07/14 21:53
12F：→ chvkimo:所謂的fresh prepare 是從哪一步驟開始呢? 願聞其詳 @@ 07/15 13:37
13F：推 blence:這東西至少有三種用途,分別是用於動物體致突變,加於細胞中 07/15 14:00
14F：→ blence:觀察特定位點或突變spectrum,及研究DNA damage的反應 07/15 14:01
15F：→ blence:不同實驗不同劑量就會有對應做法,從mM~200nM都有人用,當然 07/15 14:05
16F：→ blence:得配合你的用途,像G&D 18,1331-44描述的,就是類似我的做法 07/15 14:13
17F：→ chvkimo:恩 我是要處理細胞用的 07/16 13:00