作者chvkimo (达)
看板Biotech
标题[求救] 关於MNNG
时间Mon Jul 14 17:44:27 2008
N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG),
MNNG 是一种致突变剂,配制是使用DMSO回溶
由於先前学长(毕业以久)把一罐5g 以50mL DMSO回溶(679M)
保存在 4度C, 另外有使用PBS稀释至6.79mM 再保存4度C
可能每次使用都拿 已稀释过的.
但是最近看到一篇文章的使用方式是freshly made,内容如下
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N-Methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) (Sigma)
was dissolved in DMSO and was freshly made for each experiment.
For experiments involving MNNG, because of the short
half-life of MNNG (1 h), media were not replaced before cells
were harvested.
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想请问有碰过MNNG的大大,是要每次都拿出来秤重再以DMSO回溶吗?
在DMSO里是否很快就分解了呢?
因为这是很强的致突变剂,比较不希望常常拿出来秤.
谢谢~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.94.184
※ 编辑: chvkimo 来自: 163.25.94.184 (07/14 17:59)
1F：推 konlon:liquid MNNG之half life约为1hr,所以药用的时候要配新鲜的 07/14 18:50
2F：推 blence:alkylation agent很少这样保存的,尤其这麽毒是不该每次秤重 07/14 19:57
3F：→ blence:DMSO在-20度C避光保存吧,如果你的final是在uM浓度下 07/14 20:00
4F：→ chvkimo:konlon大是直接翻译吗? 我是想问有经验的人 07/14 20:01
※ 编辑: chvkimo 来自: 163.25.94.184 (07/14 20:02)
5F：→ chvkimo:回blence大,对阿 很毒,所以我也不想常常拿出来秤,主因是 07/14 20:04
6F：→ chvkimo:之前学长一直冰在4度C(不过应该是mM的),但是看到这篇paper 07/14 20:06
7F：→ chvkimo:又写半衰期只有一小时,所以应该跟你的想法差不多 谢谢 07/14 20:07
8F：→ chvkimo:不过还是谢谢上面两位提供想法 07/14 20:07
9F：→ chvkimo:发这篇文最主要是想问看看用过MNNG的人的经验 07/14 20:08
10F：推 konlon:我用过 paper都说要fresh prepare 07/14 21:12
11F：推 wallpaper:我有疑问(举手)...我每次只用1 lamda 怎麽fresh prepare 07/14 21:53
12F：→ chvkimo:所谓的fresh prepare 是从哪一步骤开始呢? 愿闻其详 @@ 07/15 13:37
13F：推 blence:这东西至少有三种用途,分别是用於动物体致突变,加於细胞中 07/15 14:00
14F：→ blence:观察特定位点或突变spectrum,及研究DNA damage的反应 07/15 14:01
15F：→ blence:不同实验不同剂量就会有对应做法,从mM~200nM都有人用,当然 07/15 14:05
16F：→ blence:得配合你的用途,像G&D 18,1331-44描述的,就是类似我的做法 07/15 14:13
17F：→ chvkimo:恩 我是要处理细胞用的 07/16 13:00