作者auspiciousme (AusPiCious)
看板Biotech
標題[討論] 塗plate時勝任細胞加的量
時間Tue Jul 1 19:46:12 2008
請問各位大大
就是transformation後
要把轉入plasmid後的E.coli塗到plate上
可是我一直都不知道要加多少量的勝任細胞到plate上耶
我之前是全加
可是這樣會不會加太多了?
小弟是新手
請各位多多指教^^
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.215.11
1F：推 aceliang:我是都spin down之後resuspend，通通丟下去(約150uL) 07/01 19:49
2F：推 tracyw:以前用買來的勝任細胞 transform purified plasmid DNA 07/01 20:11
3F：→ tracyw:total 100ul 加 3-5ul 就長很多了 07/01 20:13
4F：推 vancent:100~200ul差不多了~你那樣加有1cc吧= = 07/01 20:38
5F：推 milkpa:如果是做ligation的，spin down全下，丟質體的10％就夠了 07/01 20:57
6F：推 pupuwu:建議先了解勝任細胞的轉型效率 避免效率太好挑不到單一菌落 07/01 22:31
7F：推 sGoat:考慮到效益跟密度,不要塗一盤都沒有,或是密密麻麻挑不出來 07/02 10:26
8F：→ sGoat:使用購買的plasmid或是compentent cell kit會寫要加多少 07/02 10:27