作者auspiciousme (AusPiCious)
看板Biotech
标题[讨论] 涂plate时胜任细胞加的量
时间Tue Jul 1 19:46:12 2008
请问各位大大
就是transformation後
要把转入plasmid後的E.coli涂到plate上
可是我一直都不知道要加多少量的胜任细胞到plate上耶
我之前是全加
可是这样会不会加太多了?
小弟是新手
请各位多多指教^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.215.11
1F：推 aceliang:我是都spin down之後resuspend，通通丢下去(约150uL) 07/01 19:49
2F：推 tracyw:以前用买来的胜任细胞 transform purified plasmid DNA 07/01 20:11
3F：→ tracyw:total 100ul 加 3-5ul 就长很多了 07/01 20:13
4F：推 vancent:100~200ul差不多了~你那样加有1cc吧= = 07/01 20:38
5F：推 milkpa:如果是做ligation的，spin down全下，丢质体的10％就够了 07/01 20:57
6F：推 pupuwu:建议先了解胜任细胞的转型效率 避免效率太好挑不到单一菌落 07/01 22:31
7F：推 sGoat:考虑到效益跟密度,不要涂一盘都没有,或是密密麻麻挑不出来 07/02 10:26
8F：→ sGoat:使用购买的plasmid或是compentent cell kit会写要加多少 07/02 10:27