作者lagigi (la)
看板Biotech
標題[討論] 請教Flow cytometry的問題
時間Tue Jun 24 21:59:53 2008
我目前使用染PI的方式 來觀察cell cycle(主要看SubG1)
一直以來心中有幾個疑問 想在這裡請教大家 (我使用的是BD舊型機器)
在收data前 一般都會先畫4個圖(fsc vs ssc,FL2A vs FL2W,FL2A,FL2H)
1.因為上過課 說染PI是要看整體DATA 所以不需要有gate的動作(這樣說對嗎)
2.fsc vs ssc,FL2A vs FL2W的做圖 只是為了做調整data圖形到中間嗎
如果是這樣,我只要作fsc vs ssc不就好了(是這樣說嗎?)
fsc vs ssc,FL2A vs FL2W的呈現是否會影響到FL2A或FL2H的調整嗎?
3.最後data呈現,有人說以FL2A呈現就好 但也有人說以FL2H呈現就好
兩者表示的意義有差嗎?(FL2A,FL2H收DATA前我都有畫,但FL2H似乎比較好
調整到我要的位置)
4.處理細胞時是否須要用Triton-x 打洞(有的protocol會要加)
請高手幫我解惑 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.73.7.95
※ 編輯: lagigi 來自: 203.73.7.95 (06/24 22:00)
※ 編輯: lagigi 來自: 203.73.7.95 (06/24 22:01)
1F：推 K587262:都沒人回 我推一個:我跑cell cycle跟subG1是不同條件 06/25 18:57
2F：→ K587262:所以想想原理 清楚你要的目標後 問題迎刃而解 06/25 18:57
3F：→ K587262:otherwise, A跟H的意義不大相同...... 06/25 18:58
4F：推 seal0413:我有gate...fsc-ssc gate fl2a-fl2h 06/27 10:31
5F：→ seal0413:triton不一定要加吧...不過我會固定至少overnight 06/27 10:32
6F：→ seal0413:我的gate不管cell cycle和看subG1都有...只是fl2a-fl2h 06/27 10:34
7F：→ seal0413:圈的細胞群會有差 06/27 10:35