作者lagigi (la)
看板Biotech
标题[讨论] 请教Flow cytometry的问题
时间Tue Jun 24 21:59:53 2008
我目前使用染PI的方式 来观察cell cycle(主要看SubG1)
一直以来心中有几个疑问 想在这里请教大家 (我使用的是BD旧型机器)
在收data前 一般都会先画4个图(fsc vs ssc,FL2A vs FL2W,FL2A,FL2H)
1.因为上过课 说染PI是要看整体DATA 所以不需要有gate的动作(这样说对吗)
2.fsc vs ssc,FL2A vs FL2W的做图 只是为了做调整data图形到中间吗
如果是这样,我只要作fsc vs ssc不就好了(是这样说吗?)
fsc vs ssc,FL2A vs FL2W的呈现是否会影响到FL2A或FL2H的调整吗?
3.最後data呈现,有人说以FL2A呈现就好 但也有人说以FL2H呈现就好
两者表示的意义有差吗?(FL2A,FL2H收DATA前我都有画,但FL2H似乎比较好
调整到我要的位置)
4.处理细胞时是否须要用Triton-x 打洞(有的protocol会要加)
请高手帮我解惑 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.73.7.95
※ 编辑: lagigi 来自: 203.73.7.95 (06/24 22:00)
※ 编辑: lagigi 来自: 203.73.7.95 (06/24 22:01)
1F：推 K587262:都没人回 我推一个:我跑cell cycle跟subG1是不同条件 06/25 18:57
2F：→ K587262:所以想想原理 清楚你要的目标後 问题迎刃而解 06/25 18:57
3F：→ K587262:otherwise, A跟H的意义不大相同...... 06/25 18:58
4F：推 seal0413:我有gate...fsc-ssc gate fl2a-fl2h 06/27 10:31
5F：→ seal0413:triton不一定要加吧...不过我会固定至少overnight 06/27 10:32
6F：→ seal0413:我的gate不管cell cycle和看subG1都有...只是fl2a-fl2h 06/27 10:34
7F：→ seal0413:圈的细胞群会有差 06/27 10:35