作者purcanny ( trade-off )
看板Biotech
標題[求救] 請問內容之細胞生長曲線之作法是否正確?
時間Thu Jun 19 08:30:04 2008
關於細胞生長曲線的實驗作法,目前老闆要我如下操作:
將細胞計數3*e5入75T flask中培養,
分別於培養後24,48,72,96小時四個時間點打下細胞計數數目,
再做成曲線後推算細胞快速生長期為以3*e5 seeding後培養後第幾個小時.
如此求得細胞快速生長期之後,再將快速生長期之細胞打下seeding至96-well-plate,
以進行MTT assay做drugs screen.
我的疑問在於:
1.將細胞養在75T flask中,於培養後24小時打下計數,假設原來繼代代數是
N1那打下來計數後再貼回,繼代代數是否為N2?那麼以此類推,
假設在24,48,72,96小時都要打下來計數,是否最終繼代代數已為N5?
2.且每次打下細胞再貼回過程中難免有細胞lost情形發生,
每次打下再貼回細胞也需要一些時間重新適應,不是嗎?
以此方法進行,據老闆說法會求的較精準的細胞生長曲線,可是我真的不太懂他的說明,
請問有哪位大大好心可以解惑一下嗎?
感謝大家<(_ _)>
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