作者purcanny ( trade-off )
看板Biotech
标题[求救] 请问内容之细胞生长曲线之作法是否正确?
时间Thu Jun 19 08:30:04 2008
关於细胞生长曲线的实验作法,目前老板要我如下操作:
将细胞计数3*e5入75T flask中培养,
分别於培养後24,48,72,96小时四个时间点打下细胞计数数目,
再做成曲线後推算细胞快速生长期为以3*e5 seeding後培养後第几个小时.
如此求得细胞快速生长期之後,再将快速生长期之细胞打下seeding至96-well-plate,
以进行MTT assay做drugs screen.
我的疑问在於:
1.将细胞养在75T flask中,於培养後24小时打下计数,假设原来继代代数是
N1那打下来计数後再贴回,继代代数是否为N2?那麽以此类推,
假设在24,48,72,96小时都要打下来计数,是否最终继代代数已为N5?
2.且每次打下细胞再贴回过程中难免有细胞lost情形发生,
每次打下再贴回细胞也需要一些时间重新适应,不是吗?
以此方法进行,据老板说法会求的较精准的细胞生长曲线,可是我真的不太懂他的说明,
请问有哪位大大好心可以解惑一下吗?
感谢大家<(_ _)>
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