作者HIbaby (燃燒吧! 嗨~北鼻!)
看板Biotech
標題[求救] stable cell line
時間Fri Jun 6 14:18:08 2008
想請教一下大家
我的直體沒有一些抗-抗生素的基因
如果想要製造stable cell line
可行嗎?
有聽說伴隨另一個抗-抗生素的基因一起trasfection
有可能可以篩選到? (Tet-On system)
有人有這樣的經驗嗎?
謝謝各位.
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◆ From: 133.11.70.111
1F：推 blence:是可以co-transfect如pNeo這種plasmid以>3:1的比例或許可以 06/06 15:16
2F：推 sunorange:不過 我很好奇 沒有篩選 直接看結果嗎 這樣要有好運氣 06/06 15:17
3F：→ blence:挑到,不過我覺得效率不佳,染IF發現mix clone只有1/100不到 06/06 15:18
4F：→ blence:的細胞是有表現的(只是你這要怎麼用Tet-On調控表現?) 06/06 15:20
5F：→ HIbaby:喔, 謝謝blence ^^ 我不是要做tet-on 只是這種方法從tet-on 06/06 16:28
6F：→ HIbaby:的建構過程中(別人在做)聽到的. 所以想問一下可行與否 ^_^ 06/06 16:28
7F：→ HIbaby:想建構的是luc的stable, 還是直接找別種vector比較快 ^^ 06/06 16:30
8F：推 viorf:可以把細胞稀釋 種在96well中 一格一顆 這樣種個十盤以上 06/06 22:37
9F：→ viorf:最後從長出來的那幾個去選哪個是你要的 06/06 22:38
10F：→ viorf:一整個苦功 06/06 22:38
11F：推 blence:luc似乎很少人挑stable,而且挑到還不好方便測是single,不知 06/06 22:54
12F：→ blence:有沒ab可用w看,不過篩選的部分還是重新剪marker來接最快了 06/06 22:58
13F：→ HIbaby:謝謝大家的幫忙 ,感謝 ^^ 06/09 11:05