作者HIbaby (燃烧吧! 嗨~北鼻!)
看板Biotech
标题[求救] stable cell line
时间Fri Jun 6 14:18:08 2008
想请教一下大家
我的直体没有一些抗-抗生素的基因
如果想要制造stable cell line
可行吗?
有听说伴随另一个抗-抗生素的基因一起trasfection
有可能可以筛选到? (Tet-On system)
有人有这样的经验吗?
谢谢各位.
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◆ From: 133.11.70.111
1F：推 blence:是可以co-transfect如pNeo这种plasmid以>3:1的比例或许可以 06/06 15:16
2F：推 sunorange:不过 我很好奇 没有筛选 直接看结果吗 这样要有好运气 06/06 15:17
3F：→ blence:挑到,不过我觉得效率不佳,染IF发现mix clone只有1/100不到 06/06 15:18
4F：→ blence:的细胞是有表现的(只是你这要怎麽用Tet-On调控表现?) 06/06 15:20
5F：→ HIbaby:喔, 谢谢blence ^^ 我不是要做tet-on 只是这种方法从tet-on 06/06 16:28
6F：→ HIbaby:的建构过程中(别人在做)听到的. 所以想问一下可行与否 ^_^ 06/06 16:28
7F：→ HIbaby:想建构的是luc的stable, 还是直接找别种vector比较快 ^^ 06/06 16:30
8F：推 viorf:可以把细胞稀释 种在96well中 一格一颗 这样种个十盘以上 06/06 22:37
9F：→ viorf:最後从长出来的那几个去选哪个是你要的 06/06 22:38
10F：→ viorf:一整个苦功 06/06 22:38
11F：推 blence:luc似乎很少人挑stable,而且挑到还不好方便测是single,不知 06/06 22:54
12F：→ blence:有没ab可用w看,不过筛选的部分还是重新剪marker来接最快了 06/06 22:58
13F：→ HIbaby:谢谢大家的帮忙 ,感谢 ^^ 06/09 11:05